荧光分光光度法测定面粉中核黄素（VB2）.ppt

荧光分光光度法测定面粉中核黄素（VB2）.ppt荧光分光光度法测定面粉中核黄素(VB2)
一、实验目的
二、实验原理
三、FL-4500型气相色谱仪
四、实验步骤
五、数据处理
六、思考题
复旦化学系
教学实验中心
包慧敏
2017/12/18
1、掌握面粉样品的消化方法,了解溶液的pH值等对核黄素荧光强度的影响。
2、了解荧光分光光度计的主要结构及工作原理,掌握其正确使用方法。
3、荧光分析法基本原理和学习测绘核黄素的激发光谱和荧光光谱,标准曲线法定量分析。
一、实验目的
2017/12/18
二、实验原理
1、荧光、荧光分子/荧光物质
2、荧光分析法:特点、定量方法
3、核黄素VB2:结构、性质、面粉中提取方法
4、荧光分光光度计:结构、原理、操作
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荧光产生的机制——去活化过程
问题1. 荧光、荧光分子
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强荧光物质
结构特点:→﹡、共轭体系、刚性平面结构、取代基
如荧光素和酚酞结构十分相似,荧光素在溶液中有很强的荧光,而酚酞没有。
如芴和联苯在相同的条件下,
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影响荧光发射溶液环境因素 :
(a)溶剂效应:取决于荧光体和溶剂的化学结构、极性、重原子效应(b)温度:T ↑φf↓(c)pH 平衡解离关系对、φf 均有影响
溶液荧光的猝灭
荧光物质分子与溶剂分子或溶质分子之间相互作用而导致荧光强度下降的现象称为荧光的猝灭(或熄灭)
引起荧光猝灭的物质称为荧光猝灭剂。
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问题2. 分子荧光分析法
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1. 原子光谱与分子光谱
原子光谱:电子能级跃迁;
分子光谱:电子能级、振动能级、转动能级跃迁
2. 吸收光谱与发射光谱
吸收光谱:从低能级向高能级跃迁,使光的强度减弱;
发射光谱:从高能级跃迁回低能级,相应的能量以光的形式辐射出来
3. 关系
原子光谱:原子吸收光谱、原子发射光谱;
分子光谱:分子吸收光谱(可见、紫外、红外吸收光谱)
光谱名称的问题:
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原子光谱 . 分子光谱
原子光谱/线光谱:
电子跃迁能级
(单重态、三重态)
分子光谱/带光谱:
电子跃迁能级
分子振动能级
分子转动能级
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激发光谱荧光光谱

IF~ex
吸收光谱 . 发射光谱
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