铜绿假单胞菌.ppt

假单胞菌属
1. 革兰氏阴性
2. 细胞单个
3. 直的或弯的杆菌
4. —1 × —4微米
5. 单鞭毛或多鞭毛
6. 有机化能异养菌
7. 呼吸代谢,永不发酵
8. 严格好氧菌
模式种:铜绿假单胞菌
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。以极生的单鞭毛运动(有二个或二个以上的极生鞭毛的细胞,但不常见)
:在酸性培养基种呈红色
,在硝酸盐培养基中除外。
℃。41℃生长而4℃不生长。

,一般认为属条件致病菌
铜绿假单胞菌
菌落特征
,尤其潮湿部位如腋下、会阴部及耳道内,呼吸道和肠道均有该菌存在,但分离率较低。
2. 医源性感染
(气管切开、保留导尿管等)
、病人与病人的接触也为传播途径之一
感染途径:
当机体免疫功能受损或缺损时,可引起严重的甚至致死性的感染。
检查意义:
人及动物的皮肤、肠道、上呼吸道等处都有该菌存在。绿脓杆菌抵抗力较强,湿热55℃1小时才被杀死。
对紫外线不敏感。对多种抗生素易产生耐药性。本菌仅于人体防御功能改变或直接进入机体(如通过泌尿道插管及静脉导管、呼吸道的通气设备和其他治疗检查方法)以及混合感染时才具有致病性。
长期使用抗生素、肾上腺皮质激素、免疫抑制剂或大面积烧伤、肾功能不全、心脏病、慢性支气管肺疾患的患者易继发绿脓杆菌的感染。
绿脓杆菌是医院内感染的重要病原菌之一。
胨 20. 0g 磷酸二氢钾
乳糖 5. 0g 牛胆盐
氯化钠 (或去氧胆酸钠) ()
磷酸氢二钾 4. 0g 水 1000ml
除乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠外,取上述成分,混合,微温溶解,调节P H值使灭菌后为7 . 4 ± 0 . 2,煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠,分装,灭菌。
培养基成分:
牛胆盐为抑菌剂,用于抑制一些杂菌的生长。
出处:《中国人民共和国药典》2010版二部附录 XI J 微生物限度检查法 P114
胆盐乳糖培养基(BL)
培养基成分:
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基
胨 10g
溴化十六烷基三甲铵
牛肉浸出粉 3g
琼脂 15~20g
氯化钠 5g
水 1000ml
除琼脂外,取上述成分,混合,微温使溶解,±,加入琼脂,加热溶化后,分装,灭菌,冷至60℃,倾注平皿。
溴化十六烷基三甲铵——具有优良的渗透、柔化、乳化、抗静电、生物降解性及杀菌等性能。本产品化学稳定性好, 耐热、耐光、耐压、耐强酸强碱。
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基是铜绿假单胞菌的选择性培养基,也是美国药典和中国药典等国推荐使用于食品、药品中铜绿假单胞菌检测的培养基。
书本P161
绿脓菌素
培养基成分:
PDP斜面,是否有色素,有,用氯仿3-5ml萃取,用无菌玻璃棒搅碎培养基、混匀,色素完全在氯仿层。吸管把氯仿层移到另一试管,加入盐酸1M1ml,静置后,盐酸出现粉红为阳性,无粉红为阴性,阴性斜面培养1-2天再重新做一遍。如果仍是阴性。做下一步试验。
绿脓菌素从有机相转到酸性水相中会由蓝绿色变为粉红色。
绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基(PDP琼脂)
胨 20g
甘油 10ml
氯化镁(无水)
琼脂 18~20g
硫酸钾 10g
水 1000ml
取胨、氯化镁和硫酸钾加入水中,微温使溶解,±,加入甘油及琼脂,加热溶化,混匀,分装于试管,灭菌,置成斜面。
书本P163
样品
10g
BL
BL
供试液
缓冲液
100ml
阴性
10ml
10ml
培养温度:36℃
培养时间:18~24h
(必要时可延长至48h)
增菌培养
十六烷基三甲基溴化铵平板
十六烷基三甲基溴化铵平板
营养琼脂斜面
BL
阳性