红细胞渗透性实验报告.doc

红细胞渗透性实验报告
实验报告模板
细胞膜的渗透性实验报告
一、实验目的:
1. 了解细胞膜的渗透性
2 .了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度二、实验原理:
1. 细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。脂溶性越高通透性越大,水溶性越高通透性越小;非极性分子比极性容易透过,小分子比大分子容易透过。水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层,不带电荷的极性小分子,如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层,尽管速度较慢,分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过,而膜对带电荷的物质如:H+、Na+、K+、Cl–、HCO3 –是高度不通透的。
2..hemolysis(溶血现象):渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压,使水进入细胞, 引起细胞吸水胀破;即红细胞膜破裂,血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。 solution(等渗溶液):渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液。 solution(高渗溶液):渗透压高于血浆渗透压的溶液称为高渗溶液。 solution(低渗溶液):渗透压低于血浆渗透压的溶液称为低渗溶液。 (半透性):膜或膜状结构只允许溶剂(通常是水)或部分溶质(一般为小分子物质)透过,而不允许其他溶质(一般为大分子物质)透过的特性。
(渗透作用):膜两侧溶液浓度存在差异,造成化学势能差,在势能差的驱动下,溶剂穿过对溶质不透膜的过程。
三、实验材料及作用:150 mmol/L NaCl , 蒸馏水,5 mmol/L NaCl,65 mmol/L NaCl, mol/L甲醇, mol/L乙醇, mol/L丙醇, mol/L乙二醇, mol/L丙三醇,2%Triton X-100,氯仿(三氯甲烷)。
:将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中:等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形;渗透压递减的一系列溶液中,红细胞逐步胀大并双侧凸起,当体积增加30%时成为球形;体积增加45%~60%则细胞膜损伤而发生溶血,这时血红蛋白逸出细胞外,仅留下一个双凹圆碟形细胞膜空壳,称为血影细胞(ghost cell)。%NaCI溶液中时开始出现溶血,%NaCI溶液中时完全溶血.
:小分子、亲脂性的非极性分子甲醇为低渗溶液,容易溶解于脂双层,并迅速透过,提高红细胞的渗透压,促使水分进入细胞,引起溶血。
:乙醇是脂溶性小分子,可以自由扩散进出细胞。红细胞外有相对高浓度的乙醇,大量乙醇分子顺浓度差进入红细胞,使红细胞内渗透压高于红细胞外渗透压,水通道开放,大量水分子进入红细胞,发生溶血。
,丙二醇,丙三醇的作用与甲醇,乙醇的作用相似,都是脂溶性分子,随着分子量的增加,分子的增大,溶血时间增加。
。非离子型去垢剂如TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团,它们主要与蛋白质疏水部位相互作用,一般不会引起蛋白质变性。而离子型去垢剂与蛋白结合后可改变蛋
白质结构,使之变性,尤其是加热后可使蛋白质解离为单体,如十二烷基磺酸钠(SDS)等。多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物,从而使细胞膜破裂,释放出细胞内物质。:氯仿是很好的脂类萃取剂,不能够发生溶血现象。四、实验过程:
,加入适量抗凝剂备用 。 、实验结果分析:
mmol/L NaCl:
结论:Na+和Cl-不能以自由扩散方式通过细胞膜, NaCl不能导致溶血;而H2O可以很快地进入细胞内,使细胞膨胀溶血。

结论:150 mmol/L NaCl溶液与羊血细胞是等渗溶液,所以不能溶血,5 mmol/L NaCl与65 mmol/L NaCl溶液为低渗溶液,能够是红细胞吸水涨裂。浓度越低,与细胞的渗透压相差越大,渗透作用越强,越容易发生溶血。 ,乙醇,丙醇
结论:血细胞在相同浓度的甲醇,乙醇,丙醇中都能溶血,但是时间不同,随着分子量的增加,分子增大,溶血时间增长,这说明溶血时间的长短不但与分子的极性有关,还与分子的大小有关。
,丙二醇,丙三醇
结论:丙醇,丙二醇,丙三醇都是极性分子,都能使红细胞溶血,但是丙三醇的分子较大,所以溶血时间较长。 %Triton X-100,氯仿
结论:非离子