反相高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度方法改进.pdf

· 药物研究· 中目茜年月日第卷第期
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反相高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度方法改进
覃兴昆,程道海
广西医科大学第一附属医院药学部,广西南宁
摘要:目的改进测定万古霉素血药浓度的反相高效液相色谱—法。方法采用外标法。血样处理,血浆经% 硫酸锌、℃
水浴孵育沉淀蛋白,×.,,流动相为/磷酸二氢钾溶液用磷酸
:,柱温℃,流速./,检测波长,进样体积。结果万古霉素检测质量浓度在—
/范围内与峰面积呈良好线性关系.,检测限为./。平均相对回收率为.% , 为.%
,日内与日间均小于.% 。结论该法简单灵敏、无杂质干扰、线性范围宽、成本较低,适用于基层医院的治疗药物监测。
关键词:万古霉素;反相高效液相色谱法;血药浓度;方法改进
中图分类号:.:.;. 文献标识码: 文章编号:———
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万古霉素的安全治疗范围较窄,且具有耳、肾毒性,故临床应. 溶液制备
用时需要监测血药浓度,其有效范围为峰浓度—/、谷精密称取万古霉素对照品.,用蒸馏水溶解并定容
浓度~/。采用内标法测定万古霉素血药浓度“,条至,配制成质量浓度为/的万古霉素对照品贮备
件苛刻;血浆处理过程烦琐,或使用如三氯甲烷、二氯甲烷等有液。称取硫酸锌.,用蒸馏水溶解并定容至,配制成
害有机溶剂;流动相采用乙腈一缓冲盐系统,成本高且%硫酸锌溶液,作为沉淀剂。所有配制成的溶液置℃冰箱保
毒性大。笔者采用外标法,并对血浆中万古霉素的提取过程等条存备用。
件进行了改进,操作简单,结果准确。现报道如下。. 血样处理
仪器与试药取血浆,,加入沉淀剂,
一型高效液相色谱仪日本岛津;型电子涡旋混匀,置℃水浴锅中加热,取出,/
分析天平江苏常熟衡器厂;一型精密计上海雷磁离心,取上清液进样。
仪器厂; 一型涡旋混合器上海医科大学仪器厂; . 方法学考察
/型高速离心机美国雅培公司;一型溶剂专属性考察:取万古霉素对照品贮备液,用蒸馏水稀释成质
过滤器天津市津腾实验设备有限公司;一型循环水式多量浓度为/的对照品溶液,直接进样;另取空白血浆、空白
用真空泵郑州长城科工贸有限公司;型超声仪上海血浆十万古霉素对照品,。结果万古霉素峰形
公司。万古霉素对照品中国药品生物制品检定所,批号较好,血浆中内源性杂质对万古霉素测定无干扰。色谱图见图。
—,含量为% ;人新鲜血浆广西南宁市中心线性关系考察:取万古霉素对照品贮备液,用空白血浆稀释
血站;甲醇色谱级,国药集团化学试剂公司,磷酸二氢钾、磷成质量浓度为,,,,,,,,/的对照品溶液,
酸、硫酸锌均为分析纯。,取进样测定,以质量浓度对峰
方法与结果面积,进行线性回归,得回归方程.
. 色谱条件.。结果表明,万古霉素质量浓度在~/范围内
色谱柱:一柱.,, 与峰面积呈良好线性关系。定量下限为/,按信噪比法得检
公司;流动相:/磷酸二氢钾用磷酸调至测限为./。
.一甲醇