蛋白质测定
(1)标准蛋白质溶液,用G-蛋白或牛血清蛋白( ) ,/ml的标准蛋白质溶液.
(2)考马斯亮兰G-250染料试剂:称100mg考马斯亮兰G-250,溶于50ml 95%的乙醇后,再加入120ml85 %的磷酸,用水稀释至1L
(3)用标准蛋白质(mg)为横坐标,用吸光值A595为纵坐标,作图,,根据测出的为止样品A595值,
(1)取16支试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分为两组,按表中顺序,分别加入样品,水和试剂,:0,,,,,,,-, 9,10管
管号
1
2
3
4
5
6
7
8未知样
9未知样
10未知样
蛋白质(mg/ml)
0
蒸馏水
考马斯亮兰
SOD测定
试剂:1)·L-1磷酸缓冲液();
2)130mmol·L-1甲硫氨酸(Met)溶液:
3)750μmol·L-1氮蓝四唑溶液:,避光保存;
4)100μmol·L-1EDTA-Na2溶液: EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml;
5)20μmol·L-1核黄素溶液:。
显色反应取5ml指形管(要求透明度好)4支,2支为测定管,另2支为对照管,混匀后将1支对照管置暗处,其它各管于4000Lx日光下反应20min(要求各管受光情况一致,温度高时间缩短,低时延长)。3. SOD活性测定与计算至反应结束后,以不照光的对照管做空白,分别测定其它各管的吸光度。
试剂(酶)
用量(ml)
终浓度(比色时)
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