蛋白质、核酸电泳相关溶液配制.doc

蛋白质电泳相关试剂及缓冲液<说明:如下常规试剂配制方法仅供参考>
30%(W/V)丙烯酰胺溶液
l 组分浓度 30%(W/V) Acryl amide
l 配制量 100ml
l 配制方法 ,置于250ml烧杯中。
Acryl amide 38g
BIS 2g
,充分搅拌溶解;最后定容至100ml,。
℃保存。
(注意:丙烯酰胺具有强烈的神经毒性,可通过皮肤吸收并具有累积性,配制时应戴手套操作)
40%(W/V)丙烯酰胺溶液
l 组分浓度 40%(W/V) Acryl amide
l 配制量 100ml
l 配制方法 ,置于200ml烧杯中。
Acryl amide 29g
BIS 1g
,充分搅拌溶解;最后定容至100ml,。
℃保存。
(注意:丙烯酰胺具有强烈的神经毒性,可通过皮肤吸收并具有累积性,配制时应戴手套操作)
10%(W/V)过硫酸铵
l 组分浓度 10%(W/V)过硫酸铵
l 配制量 10ml
l 配制方法 。
,贮存于4℃。
(注意:10%(W/V)过硫酸铵溶液在4℃保存能使用两周左右,过期会失去催化效果)
5X Tris—Glycine Buffer
l 组分浓度 Tris, Glycine,%(W/V) SDS
l 配制量 1L
l 配制方法 ,置于1L的烧杯中
Tris 15. 1g
Glycine 94g
SDS
,搅拌溶解。
,室温保存。
2X SDS—PAGE Loading Buffer
l 组分浓度 100mM Tris—HC1 ()
4%(W/V) SDS
%(W/V) 溴酚蓝
20%(V/V) 甘油
2%(W/V) β—巯基乙醇
l 配制量 5ml
l 配制方法 ,置于15ml塑料离心管中
1M Tris—HC1 ()
SDS
溴酚蓝 10mg
甘油 1ml
。
,,室温保存。
—巯基乙醇加入混匀。
5X SDS—PAGE Loading Buffer
l 组分浓度 250mM Tris—HC1 ()
10%(W/V) SDS
%(W/V) 溴酚蓝
50%(V/V) 甘油
5%(W/V) β—巯基乙醇
l 配制量 5ml
l 配制方法 ,置于15ml塑料离心管中
1M Tris—HC1 ()
SDS
溴酚蓝 25mg
甘油
。
,,室温保存。
—巯基乙醇加入混匀。