旱半夏组织培养条件的优化研究论文.doc

旱半夏组织培养条件的优化研究论文.doc旱半夏组织培养条件的优化研究论文
王丽艳,荆瑞勇,谭焕波,唐敏,殷奎德
【摘要】目的优化旱半夏的组织培养条件。方法以旱半夏小块茎为外植体进行组织培养。结果与结论使用卡拉胶代替琼脂固化,取得了良好的效果;旱半夏继代增殖最适培养基为:MS+6-BA mg/L+NAA mg/L,, cm;生根最适培养基为:1/2MS+NAA mg/ tissue culture condition of pinellia tenata(Thumb) S+6-BA +NAA mg/L,the coefficient of proliferation get to ,.freel,the suitable rooting medium is 1/2 MS+ mg/L,the rooting count is about 4~5,and the ratio of rooting gets to 100%.
Key b.)Breit; Tissue culture; κ-Carrageenan
半夏pinellia tenata(Thunb.)Breit为天南星科多年生草本植物,以块茎入药,是一种重要的中药材。其性温,味辛,有小毒,归脾、胃、肺,经炮制后具有润燥化痰、降逆止呕、消痞散结之功效[1]。
旱半夏多为野生,尽管具有明显的杂草性,但其繁殖系数较低,又缺乏有效的传播方式,因而是一种开拓性差的物种[2]。近年来随着连年采挖,野生资源日趋枯竭,远不能满足市场需求。人工栽培时,采用大块茎出售,珠芽、小块茎育苗,用种量大,成本高。小块茎无性繁殖易使半夏产量降低,品质退化,使半夏的栽培生产受到限制。利用组织培养建立半夏无性快速繁殖系统,可提高其繁殖系数,同时可防止品种退化问题。

本研究主要是对半夏组织培养条件进行优化,为大规模进行工厂化生产提供技术支持,前人研究中培养基使用琼脂固化,本研究尝试使用卡拉胶代替琼脂固化,取得了良好的效果,卡拉胶较琼脂价格低很多,因此可以为大规模进行工厂化生产节约成本。
1 材料与方法
材料旱半夏小块茎, 购于安国市北方药材种子经销站。
消毒方法
取健康的旱半夏小块茎,用清水洗净,放于超净工作台中灭过菌的空三角瓶中,%的升汞溶液消毒10~12 min,再用75%的酒精消毒30~60 s,最后再用无菌水冲洗5~6次,备用。
培养基及试验
设计设计以MS、1/2MS为基本培养基,基于我们的研究目的旨在指导并应用于大生产,所以为尽量节约成本和适应大规模生产所需,本试验选择了细胞分裂素中效果较好且最为廉价常用的6-BA、生长素选择了NAA,以期筛选出适合于半夏生产的最佳培养基。
发芽培养基:MS。

继代增殖培养基:,,, mg/L;,,, mg/L;采用二因素完全随机设计(见表1)进行最适激素配比的筛选,共计16个处理组合(见表2),每个处理接4株无菌苗,重复3次。表1 激素配比二因素完全随机设计因素水平(略)
生根培养基:在1/