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BMP-2、bFGF转染BMSCs与牙胚细胞联合培养对成牙基因的影响.docx


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引言
牙齿的形成是一种复杂的过程,涉及到多个成牙基因的表达和调节。其中,牙胚细胞和骨髓间充质干细胞(BMSCs)被认为是牙齿发育的重要细胞来源。因此,通过对BMSCs和牙胚细胞联合培养,可以模拟牙齿发育过程,研究成牙基因的表达和调控机制。同时,通过转染生长因子,如骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力。
本文旨在探讨BMP-2和bFGF转染BMSCs和牙胚细胞联合培养对成牙基因的表达和调控机制的影响。
材料与方法

从SD大鼠的下颌尖端收集牙胚组织和骨髓组织,分别通过组织学分离法获得牙胚细胞和BMSCs。牙胚细胞和BMSCs分别在10% FBS的alpha-MEM和DMEM/F12培养基中培养,温度为37°C,5% CO2。
-2和bFGF
BMSCs和牙胚细胞分别在12孔板上培养至80%的密度。将125 ng/mL的BMP-2和10 ng/mL 的bFGF加入到每个孔中的培养基中,进行转染。转染时间为48小时。

将转染后的BMSCs和牙胚细胞以1:1的比例混合,加入新的培养基中,进行联合培养。联合培养时间为7天。

采用实时荧光定量PCR技术检测BMSCs和牙胚细胞联合培养后成牙基因的表达情况。将RNA提取出来,并进行逆转录反应。然后使用实时荧光定量PCR检测成牙基因的表达水平。
结果
-2和bFGF可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力。
,并促进成牙基因的表达。
-2和bFGF对成牙基因的表达有不同的影响。转染BMP-2可以促进牙本质形成相关基因,如DSPP和DMP-1的表达。而bFGF转染可以促进牙釉质形成相关基因(AMEL和ENAM)的表达。
讨论
联合培养BMSC和牙胚细胞可以模拟牙齿发育过程,并促进成牙基因的表达。其中,BMP-2和bFGF转染可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力,并作用于不同类型的成牙基因。具体而言,BMP-2可以促进牙本质形成相关基因如DSPP和DMP-1的表达,而bFGF可以促进牙釉质形成相关基因(AMEL和ENAM)的表达。这些结果表明,BMP-2和bFGF在牙齿的形成和修复过程中具有重要作用。
结论
联合培养BMSCs和牙胚细胞可以模拟牙齿发育过程,并促进成牙基因的表达。BMP-2和bFGF转染可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力,并作用于不同类型的成牙基因的表达。这些结果有助于深入了解牙齿的发育和修复机制,并为牙齿的再生医学提供新的思路。

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  • 时间2025-01-30