高考生物总复习第十五章微生物的培养与应用全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖PPT课件.pptx

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高考考法突破
考法1 微生物培养与纯化
应试基础必备
考点40 微生物培养、分离及计数
考法2 微生物分离、筛选与计数
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应试基础必备
(1)培养基
①概念：人们按照微生物对营养物质不一样需求，配制出供其生长繁殖营养物质。
②成份：普通都含有水、碳源、氮源和无机盐，还需满足不一样微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气需求。
③培养基制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)无菌技术
①关键：预防外来杂菌入侵。
②方法：试验室中惯用紫外线或化学药品消毒，如用酒精擦拭双手；灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。
1．微生物培养
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(3)试验操作
①制备固体培养基
a．步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
b．倒平板操作时待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
②纯化菌种
a．原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是一个纯化细菌菌落。
b．方法：平板划线法、稀释涂布平板法。
③菌种保藏
a．暂时保留：固体斜面培养基上4 ℃保留，菌种易被污染或产生变异。
b．甘油保留：甘油瓶中－20 ℃冷冻箱中保藏。
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2．土壤中分解尿素细菌分离与计数
(1)筛选菌株
原理：人为提供有利目标菌生长条件，同时抑制或阻止其它微生物生长。
(2)统计菌落数目标方法
①显微镜直接计数法
：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量。
：用计数板计数。
：不能区分死菌与活菌。
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②间接计数法(活菌计数法)
A．原理：当样品稀释度足够高时，培养基表面生长一个菌落起源于样品稀释液中一个活菌，经过统计平板上菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌。
B．计算公式：每克样品中菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长平均菌落数，V代表涂布平板时所用稀释液体积(mL)，M代表稀释倍数。
C．操作
a．设置重复组，增强试验说服力与准确性。
b．为了确保结果准确，普通选择菌落数在30～300平板进行计数。
(3)试验流程：土壤取样→制备培养基→微生物培养与观察→细菌计数。
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3．培养基对微生物选择作用
(1)纤维素酶
纤维素酶是一个复合酶，它包含C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，含有催化分解纤维素作用，其作用过程以下：
(2)纤维素分解菌筛选原理
以纤维素作为唯一碳源选择培养基上，刚果红＋纤维素→红色复合物，纤维素分解菌可分泌纤维素酶，分解纤维素使红色消失，出现透明圈。即：可依据透明圈来筛选纤维素分解菌。
(3)土壤中纤维素分解菌筛选流程
土壤取样(要在富含纤维素环境中取样)→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到判别纤维素分解菌培养基上→挑选产生透明圈菌落。
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高考考法突破
考法1 微生物培养与纯化
(1)培养基成份
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(2)培养基分类
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(3)培养基配制标准
①目标要明确：依据微生物种类、培养目标等选择原料配制培养基，如培养自养型微生物就不用加入有机营养物质。
②营养要协调：注意各种营养物质浓度和百分比。
③pH要适宜：各种微生物适宜生长pH范围不一样。
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