不同刺激强度和频率对骨骼肌收缩影响
药物的局麻作用及肌松作用
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实验目的
观察电刺激强度的变化对骨路肌收缩张力的影响,理解阈刺激、阈上刺激和最大刺激的概念。
观察不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响,了解单收缩、强直收缩的产生机制及其意义。
观察普鲁卡因的传导麻醉作用,分析药物作用机制。
观察琥珀胆碱的肌松作用,掌握除极化型肌松药的特点及作用机制。
实验材料
实验动物:蟾蜍
器材:蛙类手术器械1套,培养皿,铁支架,肌动器,张力换能器,锌铜弓,滴管,丝线,生物信号采集处理系统。
药品:任氏液,普鲁卡因溶液,琥珀胆碱溶液
实验方法和步骤
标本制备制备离体坐骨神经-腓肠肌标本
破坏脑和脊髓:找到枕骨大孔处,将刺蛙针刺入1~2mm,分别捣损脑组织和脊髓。
剪除躯干上部及内脏:沿骶骨两侧剪开腹壁,剪除全部躯干及内脏组织,在骶髂关节水平前1~。
剥皮,将标本放在盛有任氏液的培养皿中。
清洗:将手及用过的剪子,镊子等全部手术器械洗净。
分离双后肢:沿脊柱和骨盆的正中线将脊柱分为两半,从耻骨联合中央剪开两侧大腿,将分离的另一半后肢浸入盛有任氏液的培养皿中备用。
制备离体坐骨神经-腓肠肌标本
分离坐骨神经:用玻璃针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部;沿坐骨神经沟,用玻璃针剥离坐骨神经大腿部,分离至腘窝。
分离腓肠肌:结扎腓肠肌跟腱,剪短跟腱,减去周围组织,保留腓肠肌起始点与骨的联系。
游离坐骨神经腓肠肌标本
标本安放将标本的股骨固定在肌动器上,坐骨神经轻放在肌动器电极上,用任氏液保持局部湿润;腓肠肌跟腱用线扎紧并与张力换能器相连
仪器实验
观察不同刺激强度对骨骼肌收缩的影响
选择“刺激强度与反应的关系”,系统进入信号记录状态,刺激模式可采用自动幅度调节。
给予神经一个最小的单刺激,逐渐增加刺激强度,找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度(阈强度)。不断增加刺激强度,观察肌肉收缩强度与刺激强度的关系,找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小的刺激强度(最大刺激强度)。
观察不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响
选择“刺激频率与反应的关系”,系统进入信号记录状态,刺激模式可采用自动幅度调节。
选用最大刺激强度的连续刺激,频率按1Hz、2Hz、4Hz、8Hz、12Hz、16Hz逐渐增加,分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线,观察不同频率刺激时的肌肉收缩变化,从而引导出单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩。
药物观察
观察普鲁卡因的传导麻醉作用
用含有普鲁卡因棉条包裹坐骨神经。
刺激参数:强度(1V);频率(1Hz);串长(4);刺激神经1次/分。
观察麻醉起效时间,10分钟后记录结果。
观察琥珀胆碱的肌松作用
%琥珀胆碱棉条包裹坐骨神经。
刺激参数:强度(1V);频率(1Hz);串长(4);刺激神经1次/分。
观察麻醉起效时间,10分钟后记录结果。
实验结果
1、刺激强度与反应的关系单刺激递增:
阈强度:350mV 最大刺激强度:750mV
2、刺激频率与反应的关系不完全强直和完全强直收缩:
3、药物的局麻作用普鲁卡因传导阻滞:
4、药物的肌松作用
琥珀胆碱除极化:
解除琥珀胆碱作用:
实验讨论
不同刺激强度和频率对骨骼肌收缩影响
肌肉组织是可兴奋组织
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