外植体的接种与培养.ppt

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第二节 培养方法
第三节 培养条件
第五节 试管苗的玻璃化现象及其预防措施
第四节 外植体褐变及防止
01
02
03
04
05
第四章 外植体的接种和培养
第一节 外植体的接种
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一．接种室和净化工作台的消毒
二．外植体的接种
接种室和净化工作台消毒
1
紫外灯照射20分钟；
70%酒精喷雾空气；
台面酒精棉球擦洗；
2
接种工具要经常在酒精灯上烧，防止交叉感染；
1
烧后的接种工具要放冷却后才能用；
2
操作不能离超净台边缘太近，也不能太远；
3
外植体应按照要求在培养基的表面或内部放好，不能让其在器皿中活动；
4
包扎器皿应在操作台面上进行，动作要轻，包扎好后才能从台面上移走。
5
接种时禁止谈话，防止咳嗽。
6
二．外植体的接种
A
固体培养
液体培养
B
第二节 培养方法
一．固体培养
固体培养最常用的凝固剂是琼脂，-%（重量/体积）。固体培养的最大优点是简单、方便。但缺点是1）只有外植体的底部表面才能接触培养基，吸收营养，上面则不能，影响生长速度；2）外植体插入培养基后，气体交换不畅，排泄的有害物质积累，造成毒害；3）组织受光不均匀，细胞群生长不一致。
震荡培养。
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静止滤纸桥培养
01
二．液体培养
静止滤纸桥培养
这种方法主要用于胚培养和愈伤组织培养等，目前此法不很普遍。
震荡培养
往复式摇床 自旋式培养架
温度
光照
培养基的pH
湿度
氧和其它气体
第三节 培养条件