肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝损伤修复影响的实验研究.docx

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摘要：
目的：探讨肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝损伤修复的影响，为临床治疗提供一定的参考依据。
方法：采用大鼠肝部分切除模型，将大鼠随机分为实验组和对照组。实验组注射肝星状细胞，对照组注射生理盐水。分别于术后1d、3d、7d、14d和28d采集大鼠肝组织，检测肝细胞的生存率、肝细胞增殖情况和肝功能。
结果：实验组肝细胞的生存率明显高于对照组。实验组肝细胞增殖显著，肝脏功能恢复较快，且恢复程度更好。
结论：肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝损伤修复有一定的促进作用，可以作为肝部分切除术后肝损伤的一种修复方法。
关键词：肝星状细胞；肝部分切除术；肝损伤；肝细胞增殖
正文：
肝部分切除术作为一种治疗肝脏疾病的常用手术，已经得到广泛应用。虽然该手术对患者的生命和身体健康带来了帮助，但是术后肝损伤的问题也越来越受到重视。肝损伤会影响肝脏功能的恢复，导致手术后肝脏功能的持续下降。因此，寻找有效的肝损伤修复方法，具有很高的临床意义。
肝星状细胞是肝内重要的支持性细胞，能够在肝内创伤的修复过程中扮演重要的角色。一些最近的研究表明，肝星状细胞可以作为一种肝损伤修复方法。本文的目的即是探讨肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝损伤修复的影响，并对实验结果进行分析和讨论。
1. 实验材料和方法
实验材料
实验仪器：显微镜、离心机、生物安全柜、超纯水机、氨气流量计、离子交换色谱仪。
实验试剂：肝星状细胞，生理盐水，PBS，EDTA，柠檬酸钠，氢氧化钠，KIT试剂。
实验动物：雄性SD大鼠。
实验方法
密集培养肝星状细胞：采用肝门静脉灌流法，收集4只大鼠肝脏，经D-Hanks溶液去除外血管、外胆管和结缔组织等其他组织与细胞文化。将切碎的肝组织放入DMEM高糖培养基中，离心5 min，取上清培养2 h，去除上清中细胞，加入新鲜DMEM高糖培养基、10%胎牛血清、1%青霉素链霉素混合物，4°C低温保存过夜后，改为37℃的培养箱孵育。
大鼠模型制备：60只SD大鼠，随机分为实验组和对照组，每组各30只。两组大鼠均行肝部分切除术。实验组大鼠分别于术后1d、3d、7d、14d和28d注射肝星状细胞，对照组注射生理盐水。
组织学检查：在制备肝模型的同时，选择两只大鼠，直接处死、取肝组织、制作生理盐水洗涤的自然模型，用于基础数据测定。实验组和对照组大鼠术后各个时间点，取肝组织，矫正、固定、包埋各种组织，用HE染色，用荧光显微镜进行观察。
检测肝功能：术后各时期取血，离心后拿取血清，测定肝酶的活性，如丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)。
统计学分析：数据用SPSS ，采用方差分析、t检验等方法。
2. 实验结果
肝细胞生存率
实验组肝细胞生存率明显高于对照组，表现为实验组大于对照组。
肝细胞增殖情况
实验组肝细胞增殖显著，对照组明显较少。
肝功能恢复
实验组肝脏功能恢复较快，且恢复程度更好，ALT和AST的活性明显低于对照组。
3. 结论
通过对大鼠肝部分切除术后注射肝星状细胞的实验研究，可以得出结论肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后的肝损伤有一定的促进作用，可以作为肝部分切除术后肝损伤的一种修复方法。
此实验仍有局限性，研究对象是大鼠，如果进一步研究人体，将能提供更明确且更实际的支持方法。