针刺干预对颅脑损伤模型大鼠脑组织内ERK表达及凋亡细胞的影响.docx

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摘要
目的：研究针刺干预对颅脑损伤模型大鼠脑组织内ERK表达及凋亡细胞的影响。
方法：使用50只Wistar大鼠，随机分为颅脑损伤组和针刺干预颅脑损伤组，每组25只。颅脑损伤组通过冲击性脑损伤模型制作颅脑损伤，针刺干预颅脑损伤组在颅脑损伤后24小时进行针刺干预。两组大鼠取脑组织，应用免疫组织化学检测ERK表达水平，应用TUNEL法检测凋亡细胞数目。
结果：颅脑损伤组大鼠脑组织内ERK表达水平明显下调(P<)，凋亡细胞数目明显上升(P<)。针刺干预颅脑损伤组大鼠脑组织内ERK表达水平明显上调(P<)，凋亡细胞数目明显下降(P<)。
结论：针刺干预可以通过上调ERK表达水平、降低凋亡细胞数目的方式改善颅脑损伤模型大鼠的脑组织损伤程度，对于临床上颅脑损伤的治疗具有一定的参考价值。
关键词：针刺；颅脑损伤；ERK；凋亡
Introduction
颅脑损伤作为一种常见的急性中枢神经系统损伤，其发病率在近年来逐渐提高。颅脑损伤不仅直接影响患者生命安全，而且还会带来长时间的脑功能障碍和精神障碍等后遗症。因此，如何有效地治疗颅脑损伤成为了临床上的一个热点领域。
随着中西医结合的发展，针刺作为一种重要的中医治疗方法在临床上被广泛应用。一些研究表明，针刺干预可以改善颅脑损伤亚急性期的神经功能，但其作用机制尚不十分清楚。
MAPK/ERK信号通路是一种重要的细胞信号传递通路，在细胞增殖、分化等过程中扮演着重要的角色。许多研究表明，颅脑损伤后，ERK的表达水平明显下调，这对于细胞的死亡和神经元的发生什么样的影响仍在进一步地研究中。
本研究旨在探讨针刺干预对颅脑损伤模型大鼠脑组织内ERK表达及凋亡细胞的影响，为临床上颅脑损伤的治疗提供参考。
Materials and Methods
1、实验动物
50只Wistar大鼠，雄性，体重范围在275 ~ 325 g之间，由北京大学动物实验中心提供。本研究获批后，所有大鼠按照国家实验动物管理条例管理并取得批准。所有手术和动物操作均在麻醉之后进行，以保护动物权益。
2、颅脑损伤模型的建立
将大鼠放在松香布上进行镇静，脱发和消毒。取脑部中线面上5mm和 bregma穿刺1mm处进行穿刺。穿刺器采用短且粗的自动钢针， 预先设计好相应的深度。在模型大鼠的头部区域上使用一定的压力，制造颅脑损伤。
3、针刺治疗
在颅脑损伤后24小时，将针灸针氧化化成金属色，并将其插入实验大鼠的“百会穴”中。按需要进行电刺激。
4、取脑组织样本
在颅脑损伤后48小时，将针刺干预组和颅脑损伤组的大鼠取脑组织样本。诱导其中的ERK表达水平和凋亡细胞的数目，以进行测量。
5、免疫组化分析
应用免疫组织化学检测ERK表达水平。对脑组织样本进行固定、切片、染色、包埋和镜检等，以观察脑组织中ERK表达的变化。
6、TUNEL实验
TUNEL法是一种检测凋亡细胞的重要方法。对脑组织取标本，按照TUNEL试剂盒说明书进行染色处理。然后，对取标本的样本进行观察和统计。
Results
1、ERK表达水平
±，明显下调(P<)。±，明显上调(P<)。
2、凋亡细胞数目
±，明显上升(P<)。然而，±，明显下降(P<)。
Discussion
本研究表明，针刺干预可以通过上调ERK表达水平、降低凋亡细胞数目的方式改善颅脑损伤模型大鼠的脑组织损伤程度。
ERK是一种重要的细胞信号传递通路。前人的一些研究表明，在颅脑损伤后ERK的表达水平会明显下调，这与凋亡细胞的数量明显上升有关。本研究的发现也证实了这一现象。而通过针刺干预，可以上调ERK的表达水平，降低凋亡细胞的数量。
针刺治疗作为一种重要的中医治疗方法，它具有调节机体体内免疫功能，促进内分泌调节等功能。因此，目前临床上已经广泛将针刺治疗应用于颅脑损伤的治疗中。本研究的结果为针刺干预颅脑损伤的治疗提供了新的思路和方向。
虽然本研究的结果非常明显，但是这里仍然存在一些局限性。首先，本研究仅仅以大鼠作为模型，其结果还需要与人体的真实情况进行验证。其次，本研究并没有对针刺干预的作用机制进行太多的探究，这也需要相应的进一步的研究。
Conclusion
本研究表明，针刺干预可以通过上调ERK表达水平、降低凋亡细胞数目的方式改善颅脑损伤模型大鼠的脑组织损伤程度，对于临床上颅脑损伤的治疗具有一定的参考价值。需要在临床实践中进一步验证这一结论，从而为颅脑损伤的治疗提供更加有效的策略。