722光栅分光光度计原理及使用方法.doc

722型光栅分光光度计使用说明(图)

一、原理
当一束单色光照射待测物质的溶液时,当某一定频率(或波长)的可见光所具有的能量(hf)恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应(即ΔE=E2-E1=hf)时,待测物将对该频率(波长)的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。由于在一定条件下,吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比,即A= KCL
所以,在测得吸光度 A后,可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。
722型分光光度计由光源室、单色器、试样室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成。光源为钨卤素灯,波长范围为330nm~800nm。单色器中的色散元件为光栅,可获得波长范围狭窄的接近于一定波长的单色光。其外部结构如附图所示。722型分光光度计能在可见光谱区域内对样品物质作定性和定量分析,其灵敏度、准确性和选择性都较高,因而在教学、科研和生产上得到广泛使用。
 
722型分光光度计
1. 数字显示器      2. 吸光度调零旋钮      3. 选择开关      4. 吸光度调斜率电位器
5. 浓度旋钮      6. 光源室      7. 电源开关      8. 波长手轮
9. 波长刻度窗      10. 试样架拉手      11. 100%T旋钮      12.  0%T旋钮
13. 灵敏度调节旋钮      14. 干燥器

(1)预热仪器  将选择开关置于“T”,打开电源开关,使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳,不要连续光照,预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开,使光路切断。
(2)选定波长  根据实验要求,转动波长手轮,调至所需要的单色波长。
(3)固定灵敏度档  在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下,尽可能采用灵敏度较低的挡,使用时,首先调到“1”挡,灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后,须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度,实验过程中不要再变动。
(4)调节T=0%  轻轻旋动“0%”旋钮,使数字显示为“”(此时试样室是打开的)。
(5)调节T=100%  将盛蒸馏水(或空白溶液,或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,并对准光路,把试样室盖子轻轻盖上,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示正好为“”。
(6)吸光度的测定  将选择开关置于“A”,盖上试样室盖子,将空白液置于光路中,调节吸光度调节旋钮,使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内,盖上试样室盖,轻轻拉动试样架拉手,使待测溶液进入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后,打开试样室盖,切断光路。重复上述测定操作1~2次,读取相应的吸光度值,取平均值。
(7)浓度的测定  选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
(8)关机  实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架用软纸擦净。

(1)为了防止光电管疲劳,不测定时必须将试样室盖打开,使光路切断,以延长光电管的使用寿命。
(2)取拿比色皿