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细胞凋亡与胰腺炎论文.doc


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细胞凋亡与胰腺炎论文.doc细胞凋亡与胰腺炎论文
关键词:细胞凋亡胰腺炎治疗
胰腺炎的病理生理过程,但要从本质上阐明细胞凋亡与胰腺炎之间的关系应从细胞凋亡的分子机制来进行研究。现在认为细胞调亡参与胰腺炎发病主要有两种机制:一类是受基因调控;另一类则是非基因调控。
1基因调控
受基因调控的细胞调亡又称为程序性细胞死亡。一般分为两类:一类是直接调控,如癌基因;另一类则是间接调控。如生物活性分子,通过诱导癌基因的表达发挥调控作用。
癌基因中bc1-2基因家族是最受关注的与细胞凋亡相关的基因之一。aacke等3在行ERCP时收集了27例慢性胰腺炎病人胰液细胞学标本,并应用一系列p53特异性单抗PAb1620、PAb1801、PAb240及CM-1(人重组p53多克降抗血清)以免疫过氧化酶染色观察p53表达情况,同时以TUNEL法检测调亡细胞。结果示,27例慢性胰腺炎病人中有16例(59%)p53蛋白表达阳性,11例PAb1620表达阳性,同时发现有凋亡细胞。可能的机制是慢性胰腺炎时氧自由基和一氧化氮基团损伤DNA。p53表达增加可能是DNA损伤的结果,并在DNA损伤的基础上诱导细胞调亡。有人认为野生型p53提高细胞内bax蛋白表达使得bc1-2/bax比例失衡而促进细胞凋亡4。
在基因调控与细胞凋亡关系的研究中,另一热点课题是一些间接调控细胞凋亡的生物活性分子,如转化生长因子(TGF)β、肿瘤坏死因子(TNF)等。最近,Subramanian等5从源于人中胚层的成骨细胞中识别一种TGF-β调控的锌指编码基因的TIEG(TGF-β诱导的早期基因)与胰腺炎细胞凋亡有关。为进一步研究TGF-β在胰腺外分泌细胞群中的表达、功能及其调控机制,Tachibana等6对培养的鼠胰腺AR42J细胞和人五种胰腺外分泌细胞PANC1、MIAPaCa2、BxPC3、HST66T和Capan1进行免疫印迹分析,结果发现,在这六种外分泌细胞中均有丰富的TIEGmRNA表达。应用纯化的TIEG亲和抗体进行定位检查发现TIEG存在于正常人胰腺外分泌部导管和腺细胞群。研究还发现,经TGF-β处理上述细胞2小时后可见TIEG表达上调。为进一步观察TIEG的表达增加是否诱导胰腺外分泌细胞凋亡,用5ng/mltGF-β1处理PANC1细胞24小时、48小时和72小时,结果显示,在任一时间点TGF-β1都增加凋亡率,尤以72小时后为最甚。为进一步证实TIEG表达具有增加诱导凋亡功能,还进行了转染实验。用10μg表达TIEG载体(pMEX-neo-TIEG)转染PANC1细胞和仅转染对照载体(pMEX-neo)的PANC1细胞及未转染细胞进行研究。MTS增殖分析结果示,未转染细胞和pMEX-neo细胞生长正常;pMEX-neo-TIEG细胞增殖停止,而且72小时后pMEX-neo-TIEG细胞量较实验初低。DNA梯形图谱分析表明,pMEX-neo-TIEG细胞凋亡数在任一时刻均超过30%,而且还发现pMEX-neo-TIEG细胞凋亡率比TGF-
β1处理的PANC1细胞凋亡率高,这可能是观察到的TGF-β1处理的PANC1细胞TIEG上调是瞬时的,而pMEX-neo-TIEG细胞内的TIEG上调则是稳定的。因此,TGF-β诱导的TIEG表达增加可诱导细胞凋亡。
还有一些资料表明,TNF是介导细胞凋亡的

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  • 上传人小博士
  • 文件大小51 KB
  • 时间2018-03-14
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