食醋中总酸度和氨基酸中氮含量的测定.doc

食用米醋中总酸量和氨基酸氮含量的测定 
 
一、目前有关该元素常量测定方法的概述:
米醋的主要成分为醋酸,此外还有少量的其他弱酸。要测定其总酸度,我们可以用NaOH标准溶液滴定,用酚酞作指示剂,从而测得其总酸度。
对于氨基酸氮含量的测定,主要有4种方法:
(1)我们先是使-NH2与甲醛结合,其碱性消失,破坏内盐的存在,就可以用碱来滴定-COOH基,以间接方法测定氨基酸的量。由于米醋中氨基酸的含量比较少,所以测出的结果准确度较低,选择性较差,滴定终点不易掌握,结果不够理想,而且甲醛会对环境造成污染。
(2)把氨基酸中的-NH2转化成NH4+,因NH4+的酸性太弱,不能用NaOH标准溶液直接测定,所以用甲醛法进行测定NH4+。甲醛与NH作用生成质子化(CH2)6 N4H+和H+反应式为:
              
 ⑶氨基酸氮的测定还可以利用Hantzsh反应原理,用乙酰丙酮—甲醛混合溶液作为氨基酸的衍生物,采用吸光度法测定食醋中氨基酸态氮的含量。
⑷电位滴定法根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液中构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。
 
二、实验原理:
1、关于总酸量的测定
醋酸为有机弱酸(Ka=×10-5), 与NaOH反应式如下:
        HAc + NaOH = NaAc + H2O
反应产物为强碱弱酸盐,滴定突跃在碱性范围内,可选用酚酞等碱性范围变化的指示剂。食用米醋中的主要成分是醋酸,其总酸度用HAc的含量来表示。
2、关于食醋中氨基酸含氮量的测定
用甲醛法测氨基酸含氮量
   氨基酸具有酸、碱两重性质,因为氨基酸含有-COOH基显示酸性,又含有-NH2基显示碱性。由于这两个基的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时,-NH2与甲醛结合,其碱性消失,破坏内盐的存在,就可用碱来滴定-COOH基,以间接方法测定氨基酸的含氮量。用碱完全中和-~,可用酚酞作为指示剂,NaOH作为滴定剂。
         氨基酸态氮含量=(N×V××100%)/W
(N:NaOH标准溶液当量浓渡;V:NaOH标准溶液消耗的总量(m1);W:样品溶液相当样品重量(克);:氮的毫克当量。)
用吸光度法测氨基酸含氮量
   β-二酮与甲醛的混合试剂与α-氨基酸具有非常灵敏的显色反应。根据Hantzsch反应原理,认为显色产物为3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶羰酸衍生物,反应式如下:
       
三、所需仪器、试剂的计划用量及配制方法
仪器:
                      
 
试剂:
1、NaOH溶液  用烧杯在粗天平上称取4g固体NaOH,加入新鲜的或煮沸的除去CO2的蒸馏水,溶解完全后,转入带橡皮的试剂瓶中,加水稀释至1L,充分摇匀。
2、酚酞指示剂  2g/L乙醇溶液
3、邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4