17—β雌二醇影响人脐静脉内皮细胞的纤溶因子活性及其基？….pdf.pdf

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第��卷第�期�中国医学科学院学报�������. ��.��
�������年���月�����������������������������������������, �����
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��—��一雌二醇影响人脐静脉内皮细胞的纤溶因子活性�
及其基�达�‘�
张莹朱广瑾�段岩平����;�����
摘要�目的观察��一芦雌二醇对人脐静脉内皮细咆纤溶因子活性、基因氛达以�
及胞内钙离子浓度����“��.�的影响。方法应用发色底物法、细胞原位杂交技术和激�
光共聚焦扫描显微镜。结果组织型纤溶酶原激活物活性及其基因表达随��口一雌��
醇浓度的增加而呈剂量依赖性增加;单个内皮细胞胞内钙离子浓度在高浓度雌二醇�
作用下先上升后下降,生理浓度时降低。结论雌激素可以提高纤溶能力、桔杭胞内�
���浓度升高,为雌激素保护心血管作用机制研究提供�部分实验依据。�
、��七一��
关键词���一�鬯三曼�『内皇麴堕�组织型纤溶酶原激活物�
中圉号��浓度�人�涨拓弱�锄�蒹述�
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许多研究表明雌激素具有心血管保护作用,如外源性雌激素可以改善血脂�一、糖代谢��和�
血管反应性口�等,但其作用机制尚不十分清楚。已知血管内皮功能异常造成的血栓倾向性或血�
栓形成,是急性心肌梗塞的重要原因��。其中纤溶活性下降,即组织型纤溶酶原激活物�������—�
��������������������������。�—���活性降低和/或纤溶酶原激活物抑制物一������������������
���������������一�,���一��的活性升高会增加心血管疾病的危险性�本实验观察雌激素对体外�
内皮细胞释放�—��和���一�活性及其基因表达和胞内����浓度的影响,以阐述雌激素对心�
血管保护作用的可能分子生物学机制。�
�材料和方法�
试剂及器材����、���一�活性发色底物试剂盒������������������������������������������
������������������������一��购自上海医科大学生化一分子遗传室,非放射性�������标记检�
测试剂盒、内皮生长因子购自德国�������������������生物公司。�����一雌二醇、胶原酶、谷�
氨酰胺、�����、����、溶菌酶等购于美国�����公司,�一����培养基、胎牛血清为�����公司�
产品。激光共聚焦扫描显微镜����������������为美国�������公司产品,还有������型酶�
联免疫检测仪、���一透射式紫外检测仪等。�
培养系统取健康产妇婴儿脐带,经�.��胶原酶消化脐静脉管腔内壁后,收集悬浮细�
�通讯作者�
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�期���一口一雌二醇影响人脐静脉内皮细胞的纤溶园子活性及其基目表达�����
胞,台盼蓝拒染法计数,加入�一����完全培养基�含胎牛血清、谷氯酰胺�内皮细胞生长园子、�
青链霉素�接种于��孔培养板中����个细胞/孔�,��������。细胞培养箱中孵育培养。�����
后基本贴壁,�~ ���铺满培养皿,在倒置显微镜下细胞呈梭形鱼贯状