第三章
抗体制备
医学技术学院免疫教研室
教学目的
掌握:颗粒性抗原的制备、可溶性抗原的制备
熟悉:可溶性抗原的纯化--盐析法
第一节免疫原的制备
免疫原(immunogen)是能诱导机体产生抗体并能与抗体发生反应的物质。
免疫原:颗粒性抗原
可溶性抗原
半抗原性免疫原
一、颗粒性抗原
细胞抗原:绵羊红细胞
细菌抗原:菌体抗原
鞭毛抗原
寄生虫体抗原:虫卵
二、可溶性抗原
:
高速捣碎法-组织捣碎机捣碎
研磨法-用玻璃匀浆器或乳钵研磨
(一)组织和细胞可溶性抗原的粗提
组织和细胞成分混合抗原制备程序
上清液
澄清
所用材料必须是新鲜或低温保存的
去除包膜或结缔组织
脏器进行灌洗
洗去血迹
及污物
NaN3
冷浴中组织剪碎
装入捣碎机筒内高速
粉碎制成组织匀浆液
3000r/min×10min
取上清液
去除细胞碎片
及微小组织
离心
(1) 超声破碎法
(2)酶处理法
(3)反复冻融法
(4)表面活性剂处理法
(1)超声破碎法
原理:利用超声波的机械振动而使细胞破碎
特点:①操作简单,重复性较好,节省时间
②多用于微生物和组织细胞的破碎
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