食品微生物学检验菌落总数培训(GB/)
2018/5/17
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内容
一、立项修订依据
二、主要修订内容
三、检验程序
四、第一法
五、第二法
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一立项修订依据
修订的背景
标准清理
多年未进行修订
修订的意义(紧迫性)
WTO的要求
原标准的局限(培养基、计数方式等)
3M纸片法
菌落总数的卫生学意义
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修订依据(修订的主要参考方法)
FDA/BAM Chapter 3 Aerobic Plate Count Jan. 2001
SN 0168-92 出口食品平板菌落计数
AOAC Aerobic Plate Count in Foods
AOAC Aerobic Plate Count
AOAC Aerobic Plate Count in Foods
USDA/FSIS MLG CHAPTER 3 EXAMINATION OF FRESH, REFRIGERATED AND FROZEN PREPARED MEAT, POULTRY AND PASTEURIZED EGG PRODUCTS
ISO 4833:1991 Microbiology -- General guidance for the enumeration of anisms -- Colony count technique at 30 degrees C
ISO 6610:1992 Milk and milk products-Enumeration Colony-forming units of anisms-Colony-count technique at 30℃
NMKL FRA JAPAN HPB
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二、修订的主要内容
——培养基由营养琼脂改为平板计数琼脂
——添加了PetrifilmTM 细菌总数检验测试片法
——菌落计数公式进行了修改
——添加了拍打式均质器或等效的设备
——………
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1、培养基改变情况
平板计数琼脂(PCA)
胰蛋白胨
酵母浸膏
葡萄糖
琼脂
蒸馏水 1000mL
营养琼脂(NA)
蛋白胨
牛肉膏
氯化钠
琼脂
蒸馏水 1000mL
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培养基改变依据
国外食品微生物权威的检测方法如ISO、AOAC和FDA/BAM等基本上都是采用平板计数琼脂或在平板计数琼脂的基础上进行了改良;
针对能力验证菌落总数的样品,采用两种培养基,结果无显著性差异;
平板计数琼脂具有细菌比较容易生长,菌落特征明显,容易计数等特点。
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2、3MTM PetrifilmTM 细菌总数试片法
国外情况
比对试验数据(已发表)
标准方法
国内情况
使用状况
比对试验数据(已发表)
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优缺点
优点:
1、培养基具有良好的生产质量;
2、菌落计数特别方便(容易判读),红色菌落,易于食品颗粒分开,也不菌落重叠现象;
3、准确计数,有方格,尤其是数目较多时,两个人分别计数同一纸片时差异;
4、菌落分布特别均匀;
5、平行平板菌落结果一致性比较好,与避免了热损伤有关;
6、菌落蔓延或半透明菌膜现象很少发生;
7、安全方面不像玻璃平皿易碎、对人员造成潜在的伤害,另外密封比较好,不容易直接接触菌落。
缺点:
1、某些有红色颗粒的样品,需要注意;粘稠的液体样品,不易分散开;表面活性比较大,易流出等
2、颜色特别重的样品,如桔黄色,掩盖了菌落;
3、抑菌剂浓度比较高的样品,如辣椒及辣椒粉、大蒜及洋葱制品;
4、某些微生物会液化凝胶,造成局部扩散或菌落模糊的现象,大部分是芽胞杆菌。
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