酶标仪的使用
主要内容
一、ELISA法介绍
二、酶标仪和多功能酶标仪
三、仪器操作
一、ELISA法介绍
经典的化学分析方法(如滴定分析、重量分析、分光光度法)能对化学体系组分进行常量或微量分析,而对复杂生物体系的微量成分的测定往往力不从心。
在此背景下,科学家研发了一系列测定生物体系成分含量的方法,其中免疫化学法(如酶联免疫法、免疫荧光法、放射免疫法)因具有高特异性、超微量分析生物体有机成分的特点而得到迅速推广和发展。
1971年人们建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术,使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,并进行定量,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法,简称ELISA。
(Enzyme-Linked Immuno-Sorbent Assay)
酶联免疫法的专用仪器就是酶标仪。
分析原理
酶标仪的分析原理与分光光度法一样,服从朗伯比尔定律。物质的含量与显色液的颜色深浅成正比,而颜色深浅可用吸光度表示,所以物质的含量与吸光度值成正比。
酶标记抗原或者抗体发生免疫学反应后,与底物的结合物,在特定波长下有最大吸收,可通过测定显色液的吸光度对待测物进行定量。
ELISA法知识
应用
什么是抗体?
什么是抗原?
什么是抗原抗体反应?
什么是抗体(Antibody)?
抗体是机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。
人类免疫球蛋白有五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。
含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。
免疫球蛋白(Ig)
免疫球蛋白(Ig)是机体受抗原刺激后产生的,其主要作用是与抗原起免疫反应,生成抗原-抗体复合物。可以阻断病原体对机体的危害,也可以引起过敏反应或其他有害反应。
免疫球蛋白的结构
免疫球蛋白都是大分子的物质,轻链和重链,
且具有抗原结合的部位。
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