草分支杆菌f.u.36对儿童急性白血病树突状细胞影响的研究.docx

摘 要
第一部分:
(乌体林斯,Utilin's,U)对儿童急性白血病外周血树突状细胞(DC)体外扩增及成熟的影响。(PBMC),对照组
以RPMll640培养液培养PBMC;实验组分为3组:实验1组,单独应用乌体林斯组∞
组.);()+重组人白细胞介素-4(rhIL4)+(rhTNF-a)(GTI组);实验3组,G1T加Utilin7s(OTI
组),分别诱导PBMC。光学显微镜下观察每同细胞生长情况,培养8天后,计数各组
细胞数量,并应用流式细胞仪检测各组细胞免疫表型。结果①实验各组与对照组之间DC的细胞数量存在明显差异(、、 ,P均<),实验各组均得到一定数量典型的DC。其中实验1组与实验2组比较差异无显著性(t=,p>),而实验3组明显高于实验2组,差异有显著性(t=, p<)。②实验各组CDla、HLA-DR、CD83的表达率均高于对照组(p均<);实验 1组与实验2组之间CDla差异无统计学意义,(t--,p>),但实验2组HLA-DR、 CD83表达率高于实验1组(、,P均<);实验3组CDla、HLA-DR、 CD83较实验1组与实验2组均明显提高,且细胞数量明显增多(p均<)。
结论Utilin's不仅对儿童急性白血病患者外周血DC有扩增作用,而且能促进其成熟, 、rhlL-4、rhTNF-a促进DC的增殖和成熟。
硕士研究生葛云鹏(儿科学) 指导教师 孙立荣 教授
关键词:草分支杆菌;树突状细胞;急性;白血病;外周血;扩增;成熟
第二部分:
影响的研究
(乌体林斯,Utilin's,LI)对儿童急性白血病外周血树突状细胞(DC)数量及功能的影响。
(PBMC),对照
组:+rhII厂4+删F-a(GIT)诱导培养DC;实验组分为四组:单独应用
Utilin7s组(U)和GIT联合不同浓度的Utilin's组(GITUl,:G1TU2, ;GITU3,)诱导培养DC,区别是于培养第3天分别加入不同浓度的Utilin's。光学显微镜下每日观察DC的形态,培养8天后收获DC,而后将DC 与儿童急性白血病异体外周血淋巴细胞混合反应96h后观察淋巴细胞的增殖情况, ELISA方法检测上清中其IL-12、IFN-T的分泌情况;另将培养8天后的HL-60抗原致敏后的DC与已培养5天淋巴细胞及HL-60细胞共孵育72h,观察不同组别DC
对淋巴细胞杀瘤作用影响的不同,MTI"法检测其杀伤活性。结果培养8天后,各组90%以上的细胞表现出较为典型的树突状。混合淋巴细胞反应显示:随着刺激细胞的增加,T细胞的扩增指数明显增加,P均<;实验各组其培养上清中IL-12、IFN-T的含量随着Utilin's浓度的增加,差异有显著统计学意义,P均<;杀瘤活性结果显示:实验各组与对照组杀伤活性比较差异均有显著统计学意义,(、、、;P均<):而且随着Utilin's浓度的增加,杀伤活性显著增大,P均<,且均较单独应用Utilin7S杀伤活性明显增加,(、、;P均<)。结论Utilin's诱导后的DC一定程度上促进T细胞的增殖和分泌,且随着其浓度的增加,作用进一步增强;T细胞杀瘤活性随着UtiliII,S浓度的增加逐步增强。在GIT 联合Utilin's后效果更为明显。提示Utilin's能够促进DC的成熟,增强DC抗原提呈能力,从而增强急性白血病外周血来源树突状细胞介导的抗白血病免疫效应。
硕士研究生葛云鹏(儿科学) 指导教师 孙立荣 教授
关键词:草分支杆菌;树突状细胞;急性;白血病;外周血;免疫功能;增殖
Part I
Effect of Mycobacterium phlei on the Culture and Proliferation of Dendritic Cells Derived fr