福建农林大学
硕士学位论文
鹌鹑输卵管特异性表达载体的构建及表达
姓名:祁喜柯
申请学位级别:硕士
专业:动物遗传育种与繁殖
指导教师:张文昌
20080401
学位�弦�论文作者亲笔签名:砷喜栖日期:��.彩、�≥/灼学位�弦�论文作者亲笔签名:冲毒栖日期:独�.�.�日期:���.�.�独创性声明论文使用授权的说明本人声明,所呈交的学位�弦�论文,是本人在指导教师的指导下独立完成的研究论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯他人知识产权的行为,由本人承担应本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位�弦�论文的规定,即学校有权送用影印、缩印或其他复制手段保存论文。年后解密可适用本授权书。不保密,本论文属于不保密。�/成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在有的责任。交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采保密,在指导教师亲笔签名:口/
阳性细胞表达数目均小于对照组����也钜旒�灾�刚.���大于����且差异极显著����,����、����和������腉�中文摘要哺乳动物生物反应器的研究已经取得了很大成就,目前,科学家已经建立牛、羊等生物反应器来生产外源蛋白。由于禽类特殊的生殖生理模式,造成禽类生物反应器的研究远远滞采用��际醭晒Φ乩┰觥⒖寺×撕�起韭亚宓鞍�’调控区的三个不同的序列�������,序列���p起嚷亚宓鞍�’调控区上游序列长约���的片段;序列���左右;序列��p起嚷亚宓鞍椎骺厍�拇萍に胤从υ<�����。使用以上三个序列与真核荧光表达载体��.�构建了三个表达载体��.�����.�����甇����匆责起韭亚宓鞍�’调控区作为启动子,替换荧光表达载体�启动子,来启动���虻谋泶铩F渲衟��甇�为��魑�素反应元件���插入到��蟂��坏闵瞎菇ǘ�伞���直泶镌靥逶陴起驹��渎压苌掀は赴�宛起九咛コ上宋�赴�系谋泶�为了检测三种载体的有效性,我们培养了鹌鹑自身的两种细胞:鹌鹑输卵管上皮细胞和鹌鹑胚胎成纤维细胞作为检测平台,将重组后的载体转染以上两种细胞,结果表明三种载体在成纤维细胞上均未表达;构建的三个表达载体在鹌鹑原代输卵管上皮细胞上均有表达但表达效果不同,在载体转染后��保��衷靥宓腉�阳性细胞表达数目都达到最高,������腉�阳性细胞表达数目大于��.��也钜煜灾�����,��—��关键词:鹌鹑;生物反应器;卵清蛋白��嘈蛄校皇渎压芴匾煨员泶镌靥�后,主要问题在于未能构建在禽类体内能有效调控外源基因表达的特异表达载体。其中上游载体的构建首要条件,实现外源基因在鹌鹁输卵管组织中的特异性表达必须有组织特性型的启动子的参与。卵清蛋白是蛋清中含量最高的蛋白,它的��骺爻煞志哂凶橹�匾煨裕�⑹�到激素的诱导,被几乎所有的研究者所利用。是为解决以上问题,发挥禽类作为生物反应器的优势,促进禽类生物技术的快速发展,本实验以鹌鹁作为研究对象,从以下几个方面进行研究:�起嚷亚宓鞍�’侧序列的克隆为包含上游调控区以及第一内含子、第一外显子、第二外显子转录起始部分序列,长����起�’调控区启动���虮泶镌靥宓墓菇�����显�械腃�启动子、��.��狾�作为启动子、��.���是在��.��幕�∩希�ù萍�福建农林大学硕士学位论文
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第一章禽类输卵管生物反应器的研究进展药物蛋白,如人血清白蛋白���⑷搜:斓鞍�硒�⑾宋�鞍自�������取���锓从ζ鞯囊庖寮胺⒄垢趴�价值的蛋白质物质,基因工程表达系统现已再次成为新的研究热点,细胞基因工程产物往科学家们想通过借助
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