MitoK_,ATP_通道开放对培养心肌细胞模拟缺血_再灌注损伤的保护机制及其功能蛋白质组研究.pdf

第三军医大学
博士学位论文
MitoK<,ATP>通道开放对培养心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤的
保护机制及其功能蛋白质组研究
姓名:李洪
申请学位级别:博士
专业:外科学(胸心外)
指导教师:肖颖彬
20040501
篓论文作者签名,;/蓥尤掌冢褐锢级第三军医大学研究生学位论文独创第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书指导教师签名:期:权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查秉承学校尸谨的校风和科研作风,本人申明所呈交的论文是我本人在成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第三军医大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为第三军医大学。学校有以采用影印、缩印或其他手段保存论文。导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解第三军医大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在阅和借阋。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,可日
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通道开放对培养心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤的保护机制及其功能蛋白质组研究摘要激活情况。第二部分,培养的心肌细胞随机分成椋炊哉兆椤⑷毖#俟嘧目的:大量的研究证据表明,通道开放在预处理抗心肌梗死中起着非常关键的作用,它是预处理心肌保护的终末效应器。然而最近的研究提示,缺血前通道开放起着启动预处理信号传导的作用。本研究旨在探讨通道开方法:本课题采用培养成年大鼠心室肌细胞的模拟缺血/再灌注模型和心肌细胞的缺氧/复氧模型,分三部分进行。第一部分,培养的成年大鼠心室肌细胞随机分预处理组。预处理后的心肌细胞均模拟缺血俟嘧。┏鱿吡L宓牧俊S妹庖哂ü夂蚖Mü∠赴幕钚院拖吡L迥さ缥坏谋浠5分别富集两组细胞的磷酸化蛋白质,采用双向电泳和质谱技术,分离鉴定预处理后心肌细胞内磷酸化蛋白的差异表达。D馊毖#俟嘧⒑螅髯樾募∠赴幕钚韵灾档,能明显增加活细胞数量,与其他预处理组相差显著,;该心肌保护效应能被放在预处理心肌保护中的作用及其与珊蚉N患せ畹南嗷ス叵担以及通道开放预处理培养心肌细胞的功能蛋白质组研究。成椋炊哉兆椤⑷毖#俟嘧⒆椤/ご碜椤疞/ご碜楹/等方法分别检测细胞的活性、的释放、细胞籏钚院方法观察淖N预处理组。预处理后,细胞均被缺氧囱三部分,培养的心肌细胞随机分成椋炊哉兆楹畉疞预处理组,但预处理第三军医大学博士学位论文组、疞预处理组、痑ご碜楹疞结果:虲疞疞/本课题由国家自然科学基金资助
处理组心肌细胞内可见清晰的条状荧光,其排列方向与肌丝方向基本一致;嘌腍募∠赴毖酰囱跛鹕撕螅髯橄吡L迥さ缥幌陆得飨;D馊毖#俟嘧⒑,;其D馊毖#俟嘧⒑螅髯樾募∠.,#俟嘧⒑螅髯樾募∠#俟嘧⒆橄嗖钕怪糜ü庀晕⒕迪鹿鄄欤哉兆橄赴诳杉⒃诘纳偈父龅阕从ü猓籇预处理组心肌细胞略有条状荧光:ご碜樾募∠∠;、胞吐相关蛋白重链⑻鞍浊崃础一鞍亚单位和假想蛋白结论:臼笛椴捎玫拇笫笮氖