mitoK_,ATP_开放改善线粒体功能预防局灶性脑缺血再灌注大鼠的细胞凋亡.pdf

复旦大学
硕士学位论文
mitoK<,ATP>开放改善线粒体功能预防局灶性脑缺血再灌注大鼠
的细胞凋亡
姓名:顾虎
申请学位级别:硕士
专业:麻醉学
指导教师:李士通
20040410
开放改善线粒体功能预防局灶性脑缺血再灌注大鼠的细胞凋亡中文稿要餐丑大学硬⑺杪畚目的:通过观察线粒体舾械娘橥ǖ#开放刹预处理在脑缺斑再灌注臻伤秘大藏摸爨中鲍作爱,磷究其在缺盘蠢灌注届对线糠馋功麓瞄及纲魏凋亡级联反应的影响。方法:以大脑中动脉检塞模型和体外纲飚氧化应激粒模型为磺究对象。只藏年健康雄性大藏,随机分成四组:偈质踝,,行的手术操作过程,但不插线阻断大脑中动脉的供血;匀毖W,行手术,术前给予生瑷盐:`旆琻瑊亍手术前嬗瓒`/畃,;~组一,,术前先给予籺畍.,蠖`.痥甈.,笤傩蠱手术。各组大脑中动脉阻断∈甭豆嘧∈焙螅︻肎婪址ò大鼠襻缀精神功能学的表现,ḿ熹滔鸽瓮龀潭龋呱涞缇倒鄄煜吡L超微结构的变化,应用蛋白质印逊法观察线粒体细胞色素酉吡L迓┏隽邪的变化,荧光标记法检测塌亡酶熬活性变他。遗过荧光援术溪褰开放裁处壤体外大鼠神经细胞的氧化应激模型:4淼拇笫脑单细胞悬液笙吡柑迥さ缥坏谋浠缝果:骰手术鳃羚评分程术蓦誊揆戳。二氨嚷缝夫舞魄精享枣静经功能译分穗对藤缺血组撼藩提高..,,`鹤榈腡粜韵赴壤藏缺巍缝稳兜有曼羲蓑雾纓,.±..%。电镜下见脑缺皿组线粒体肿玛长混浊,星空泡化,内嵴断裂,膜破损,而二氮嚷缝线粒俸莰毒轻度耱簇,基本绥穆完好,逡簇凌骧涛耀。篷与耱获盘组的趔微结构变化棚近。二氮嗪馊线粒体膜电位产生瞬时的轻度下降,然爝维持/高.
一平台;涸蚴瓜吡L迥さ缥怀室欢ㄋ俾实爻中陆担涸は雀枰欢ḿ亮康亩氮嗪可隧洚繇吼牛粅起豹线粒耗ぱ傥豢钕陆邓俾省w氚髋谭旌一肺裳嗦显的线粒体细胞色素┏龅桨`捍碜榈南赴谻漏出明显减轻。在以时间驱动模式下的的活性变化中,二氮嗪组的酶活性和变化速率嗡显低予驻缺妞组;~秘维。结论:开放刹预先处理脑缺血再灌注损伤蛉大鼠,可以提裹动物鲍戆枣孛神经评分、通过改善线粒体功能し老吡L迥さ缥缓纳ⅰ⒓跎傧吡L逑赴。懿瀑波ん婪炙嫒荔缑丶敦环词菀豹激涵来颈貉缺矗嚣细关键词:线粒体舾行约赝ǖ线粒体功能胞捌亡的发生。细胞凋亡复日大学硕士学位论文
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塞呈查兰堡主燮缝丝兰一——畜引O胰惫剖毕吡L宸┞凑习现ぞ菀杀硐缺血性脑损伤常发生于心跳呼吸骤停、体克、癫痫、体雒循环术后及缺瞧性耱瘸等,可表魂为神经精槽功溉障碍甚至簸死亡。因此有关缺盘往掘损伤髓预防和治疗方法的研究一直是国内外神经科学领域和麻醉学领域的研究热点之一。以往的研究主要关淀缺血后鲍细腿内钙超载、炎瘫反鹿及叛基困表达。最鲅芯糠王凳”合吡L骞δ懿景诠克嵴湛吹纳窬T苌酥衅鸸丶菡椋吡L迥芰看谢障碍是线粒体功能障碍的直接原因,并由此而引发细胞凋亡的级联生化反应。导致延避性的神经细胞不可逆的损害。嗣此,蒋熊找到合遥嬲靶位寒对线糖髂魄懿爨代落进≮茏В赡茉ず材匀笨宰萌蘖L骞δ苷习⒔ば魃窬胞的凋亡,减轻神经精神功能障碍的发生。脑缺血触发憾嘀炙鹕送罚詈蠖纪ü桓龉餐姆肿油贰!O吡L死和凋亡T谑笛樾阅运鹕酥校嗣欠⑾帜韵赴劳鍪歉霰苄墓蹋诟龉蛋自质合成来调节“。。在细胞凋亡的发生机制中线粒体膜电位耗散的发生早于氧自歧牟⑷衔Q踝杂苫乃鸷ψ饔檬导噬峡赡苁羌谭⒂谙吡L迥さ缥缓微镜观察到线粒体膜电位的降低应是最早发生的事件之一,殿续发生的分子枣件如鞍椎淖N弧⑾赴谻氖头沤χ沾シ⒘讼赴能在缺血过程中发生障碍,呼吸链组份脱耦联,线粒体对能鬣需求的应答能力下邋透爱转交强遭蹇=蹋珹貉大鏊承解,迸纛引缎缓粒俸功麓障褥,包括线粒体内酌钙超载、细胞色索暗蛲鲇盏纪咏氚贾孪赴劳坏摇豹蘸辍势别是垮强拳觥K徒唔俺棠页骘叙赧文芊袢旆瑼或是番有赣豹数戆”’。莅大藏孛动赫栓塞麓魏物模型韵蕊泞上,通过激光共浆焦显瞧的凋亡通鼹”。。在一铡缺血再灌注犬瓶的皮层细胞吡0舻姆跷降,导致铣傻娜癫豶缺血嚣域的亓作窠⑺岬牟室鞘歉愕膌ァ受镄伤豹线粒俸叉迸一步蒯激氧自由基鼢产生孰蔼继发了氧能瘫激的损伤。褥灌
.脑缺血时线粒体能量代谢障碍与神经细胞损伤的关系在再灌注期,线粒体是制造大量氧自由熬的主要场所”。。由于线粒体电子传递链上的巨大的氧化能力,大约獾难醣幌吡L遄;3匾谝趵胱樱耸毕粒体产生豹氧鸯幽基不断增热,加上能量衰竭导致的钙超载、内源性抗氧化机制纯物酶类可驭滴豫氧自由基,强是在脑损伤时,由于线粮体的氧化磷酸化和合成之间脱耦联贾麓罅垦踝杂苫牟凸惴旱闹使趸笳呤闺亮熬性