微生物检测样品处理方法.docx

化妆品微生物检测样品的处理(摘至GB7918) 样品的采集
,应具有代表性,一般视每批化妆品数量大小,随机抽取相应数量的包装单位。检验时,应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品,采样时可适当增加样品包装数量。
供检验样品,应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂,在检验前不得打开,防止样品被污染。
接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。如不能及时检验,样品应放在室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。
若只有一个样品而同时需做多种分析,如细菌、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做细菌检验,再将剩余样品做其它分析。
在检验过程中,从打开包装到全部检验操作结束,均须防止微生物的再污染和扩散,所用器皿及材料均应事先灭菌,全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。
供检样品的制备
液体样品
水溶性的液体样品,可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中,混匀后,制成1:10检液。
油性液体样品,取样品10g,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加10mL 灭菌的吐温80,在40℃~44℃水浴中振荡混合10min,加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃~44℃水浴中预温),在40℃~44℃水浴中乳化,制成1:10的悬液。
膏、霜、乳剂半固体状样品
亲水性的样品:称取10g,加到装有玻璃珠及90mL 灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀,静置15min。用其上清液作为1:10的检液。
疏水性样品:称取10g,放到灭菌的研钵中,加10mL灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状,再加入10mL灭菌吐温80,研磨待溶解后,加70mL灭菌生理盐水,在40℃~44℃水浴中充分混合,制成1:10检液。
固体样品
称取10g,加到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡混匀,使其分散混悬,静置后,取上清液作为1:10的检液。
如有均质器,则采用无菌样品袋,将上述水溶性膏、霜、粉剂等,称10g样品加入90mL 灭菌生理盐水,均质1min~2min;疏水性膏、霜及眉笔、口红等,称10g样品,加10mL 灭菌液体石蜡,10mL吐温80,70mL灭菌生理盐水,均质3min~5min。
补充知识:
石蜡:不溶于水、甘油、冷乙醇。溶于苯、乙醚、氯仿、二硫化碳、热乙醇。与除蓖麻油外大多数脂肪油能任意混合,樟脑、薄荷脑及大多数天然或人造麝香均能被溶解。
吐温80:本品在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶,在矿物油中极微溶解。吐温80是一个亲水性的表面活性剂,具有很强的破裂细胞膜的作用而引起刺激性,溶血性和组胺释放(致敏性)。
微生物繁殖速度:微生物一般20min繁殖一代,故微生物从稀释到倒平板不宜超过20min。
食品微生物检测样品的处理(摘自GB4789)
样品的稀释
固体和半固体样品:称取25 g 样品置盛有 225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min ~10000 r/min均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。
液体样品:以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL