实验二 淀粉酶活性的测定..ppt

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6/16/2018
生物化学实验
淀粉酶活性的测定
实验二
学时:3
6/16/2018
生物化学实验
1、学习并掌握植物体内淀粉酶活性测定
的原理和方法。
2、掌握α,β-两种淀粉酶的理化特性。
一、实验目的:
6/16/2018
生物化学实验
二、实验原理
酶(enzyme)
是具有高效性与专一性的生物催化剂(biological catalyst)。
绝大多数酶的化学本质是蛋白质。
特点:
1、酶具有高效性(high catalytic power)
2、酶具有专一性(specifity)
6/16/2018
生物化学实验
二、实验原理:酶活性(emzyme activity)
指酶催化特定化学反应的能力,其大小可用一定条件下酶促反应速度来表示,酶促反应速度可用单位时间内底物的减少量或产物的增加量来表示。
6/16/2018
生物化学实验
二、实验原理: 淀粉是植物生长期间以淀粉粒形式存在于细胞的储存多糖。种子、块茎、块根器官含量丰富。 天然淀粉含两种组分:直链和支链淀粉。多数淀粉含直链与支链淀粉的比例(20%-25%):(75%-80%)。
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生物化学实验
NRE
RE
直链淀粉
直链淀粉的螺旋结构


6个残基
RE
NRE
(1-6)分支点
支链淀粉或糖原分子示意图
支链淀粉或糖原分支点的结构
β-淀粉酶断裂
产生游离麦芽糖
6/16/2018
生物化学实验
RE
NRE
(1-6)分支点
支链淀粉或糖原分子示意图
β-淀粉酶断裂
产生游离麦芽糖
淀粉酶能催化淀粉水解为麦芽糖。
6/16/2018
生物化学实验
植物中淀粉酶有两种,各有其不同的理化特性。
α-淀粉酶耐热不耐酸,70℃加热15min仍保持活性,pH<。
β-淀粉酶耐酸不耐热,70℃加热15min则钝化。
据此钝化其中之一,即可测出另一种酶的活性。
6/16/2018
生物化学实验
本实验采用加热法钝化β-淀粉酶,测定α-淀粉酶的活性。具体方法是利用3,5-二硝基水杨酸比色法来测定淀粉酶水解生成的麦芽糖的含量,以单位时间淀粉酶分解生成麦芽糖的量来表示淀粉酶活性的大小。
6/16/2018
生物化学实验