糖化血红蛋白检测试剂盒说明书.doc

糖化血红蛋白检测试剂盒
用途:
本试剂用于测定全血中糖化血红蛋白的含量。适用于半/全自动生化分析仪。
原理:
本法是利用抗原抗体反应直接测定总Hb中HbA1c的百分含量的方法。样品中总Hb中HbA1c与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化,当加入HbA1c的特异性单克隆抗体后形成胶乳-HbA1c-鼠抗人HbA1c单克隆抗体的复合物,此复合物由于羊抗鼠IgG抗体而形成凝集,凝集量因胶乳表面固相化的HbA1c量的不同而不同。通过测定其吸光度并与HbA1c百分浓度的标准曲线比较后,可求出样品中的HbA1c占总Hb的百分含量。
试剂盒组成:
R1: 检测试剂1
胶乳 %
甘氨酸缓冲液 15mmol/L
R2: 检测试剂2
鼠抗人HbA1c单克隆抗体
甘氨酸缓冲液 60mmol/L
R3: 检测试剂3
羊抗鼠IgG抗体
甘氨酸缓冲液 60mmol/L
R4: 检测试剂4
H2O .
HbA1c多浓度校准品(另售) 人血球
样品准备:
样品为采用抗凝血,从静置3小时以上的血细胞层或2000rpm离心2分钟后的血细胞层中取出20ul,加入1mlR4(溶血液)溶血并混匀,溶血后样品在4℃条件下可稳定10天。
测定步骤:
1. 基本参数:
方法:终点法样品/试剂:1/50
主波长: 660nm 反应温度: 37℃
副波长: 800nm 反应时间: 10min
2. 操作:
R2工作液配置:将一支R3吸出加入一瓶R2中,并用R2充分洗涤R3空瓶,然后轻轻上下颠倒使试剂充分混匀,防止起泡末。随后再按下表操作:
混匀,37℃恒温1分钟后660nm波长,以空白管调零测定各管吸光度A1,4分钟后测定吸光度A2。计算△A= A2- A1 。
操作流程图:
计算:
使用多点非线性或Logit-Log4P校准模式,由仪器