PPARγ1对系膜细胞外基质生成的抑制作用及其机制.pdf

复旦大学
博士学位论文
PPARγ1对系膜细胞外基质生成的抑制作用及其机制
姓名:孙晶
申请学位级别:博士
专业:内科学
指导教师:林善锬
20040502
中文摘要的淖饔每赡苤皇荰嘁┪锏淖陨碜饔枚荘脚闹苯幼饔茫,∈驪脚ǔ尤胝婧讼赴泶镏,聊闹柿籈猰/作性测定结果显示,转染有膌,者可在小时达到高峰,而转染、庞隤岷匣钚圆舛ǖ确椒ḿ第一部分表达一ǔせ虻闹柿9菇ḿ霸谧H镜南的は赴械墓δ芗过氧化物酶体增殖物激活受体褪荘具有两种配体,一种是天然性配体,如:游离脂肪酸及其代谢产物、狿毫硪恢质呛铣尚砸┪镄耘湫荩脆邕蛲槎@嘁┪,与天然性配体相比较,类药物具有亲利性高、特异性强的特点。既往研究认为淖饔糜胫饕S胫首T撕痛煌揪队泄亍=昀囱芯糠现胍恍┘膊∪缣悄虿⒎逝帧⒍鲋嘌不⒏哐Q辜澳承┒裥灾琢龅等的发生发展具有直接的、非代谢性的对抗效应。国外大多数学者认为类药物是通过Ⅳ的激活而产生相应的作用,但是有少数研究结果指出以往认为目前绝大多数的研究仍然用的是类药物。为了明确这个疑问,我们构建了全长表达基因的质粒,转染系膜细胞鉴定质精的功能,,以脂质体介导的方法将该表达质粒法初步筛选转染效率最高的质粒,月目质体比例及转染最佳的时间点。使用逆转录聚合酶链反应、结果限制性酶切及庑蚪峁礷菇ǖ闹柿N狿ǔけ泶锘琍粲谂涮寮せ畹暮耸芴宄易宄稍敝弧MǔK档发生也有密切的关系,而且其作用不局限于代谢效应,可能对炎症、增殖、硬化在肾脏的作用机制提供有利的工具。.—疻H救胂的は赴捎昧魇较赴呛蚆细胞毒方定在系膜细胞中的表达。本研究中同时以一粆贤椒ü菇ǖ谋泶锕δ缺陷型为对照。质粒。流式细胞仪和赴痉椒ǔ醪缴秆∽H拘г孀罡叩闹柿#疛质体比例为。我们从,蛋白及的活性龇矫婕觳饬薖鰈的表达情况。的、蛋白表达在小时这个时间点达到高峰,但活/者在前后五个时间点保持大致上不变。束经怍考、导镕目的衡垒文公布复鼠大学博士学位论文
不清楚。基于上述,我们应用基因转染技术将舕细胞外基质的生成情况。脂质体转染质粒.—/、Ⅳ野生型于系膜细胞,不具有目的基因的空白质粒,作为对照,并牡鞍妆泶铩@肞S隤岷匣钚圆舛≒勋谙的は赴性变化,但舕可以显著性减少谋泶。。系膜细胞在高糖状态结论关键词:过氧化物酶增殖物激活受体第二部分过表达抑制高糖诱导的系膜细胞外基质的产生丫耐庠葱耘涮遴邕蛲槎@嗷衔,嘁物目前已作为胰岛素增敏剂而广泛应用于临床糖尿病的治疗。近年来一些动物实验和临床研究显示,在不同的疾病状念下具彳欢ǖ纳鲈嗬ぷ饔茫诸如糖尿病、高血压、,。均给予高糖碳ぁ2捎肦觳庾;ひ蜃觩一、纤溶酶原激活物抑制物.、甪、及葡萄糖转运子的基因中的活性。的表达,但其作用与篈,的转染能够上调高糖刺激下系膜细胞细胞浆中的谆铺峁┝擞欣墓系膜细胞顺粒构建兹ǔけ泶锘蜃H氪笫方法给予系膜细胞不同浓度的葡萄糖刺激,相同渗透籎廿露醇作为对照,、细胞外信号调节激酶结果高糖芄幻飨栽黾酉赴锨逡篒渗透压无关。。/。目的表达水平。采用ḿ觳庀赴锨逡褐蠺,拖肆鞍呐ǘ取和复口人学博Q宦畚
用。了疻H咀镻脚幕钚悦飨愿哂谄渌椤近年来研究发现诺呐涮逶谔悄蝠锷霾『头翘悄虿∩霾《锬P椭芯脂质体转染质粒一—/癵:型谙的は赴痪哂和脆浆与胞核朐械白员泶铩利用庞隤岷匣钚圆舛≒在系膜细胞中的活性。紧张素作用下谋泶镌黾,但,可以显著性减少过表达能显著性抑制血管紧张素诱导的系膜细胞邢一·砂蛳赴说淖R啤疍淖H静⑽奚鲜鲎饔谩_粮窳酮对蚇胞核与胞浆的比率具有显著性作刚,而对其他指标无明显作结论在不影响糖代谢的情况下,通过抑制疉及等信号的传递,来抑制高糖刺激下的系膜细胞细胞外基质的合成,增加细胞外基质的降解,化非代谢性效应的推测提供了体外依据。关键词:、降血糖或降血脂的肾脏保护作用,能显著抑制各种损伤导致系膜细胞,替代目前存在较大争议的药物和天然配体干预方法。来探讨弧刺激小时。采用检测—.、癎的基因表达水平。采用ḿ觳庀赴锨逡褐蠺虵呐ǘ取结果:能显著性降低谋泶。,但下调减少细胞外基质的积聚,同时降低牡鞍妆泶铩U馕狿哂兄苯涌褂系膜细胞离糖细胞外基质转染的肾小球