DNA的粗提取与鉴定
通过本节课的学习我们要
知道DNA提取原理
据原理设计DNA提取方法
能对DNA进行鉴定
掌握本实验的基本操作方法
DNA粗提取与鉴定
基础知识
提取DNA的方法
1、提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子
2、生物大分子
主要指蛋白质、酶和核酸
3、提取DNA的基本思路
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分
DNA提取原理
资料一:1 . DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同
,在高盐浓度下溶解度小
,细胞中某些蛋白质则溶于酒精。
资料二:
洗涤剂瓦解细胞膜。
动物细胞吸水会胀破。
资料三
——蛋白酶水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
、DNA热稳定性不同。温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
资料四:DNA的鉴定原理
当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?
在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
注意:二苯胺要现配现用,使用时取4ml二苯胺加一滴已乙醛摇匀再倒入待测样液
DNA的鉴定操作步骤
A、B试管中先分别加入物质的量的浓度为2mol/L 的NaCl溶液5ml。
其中A试管加入DNA丝状物,B不加丝状物。
各加入二苯胺4ml 试剂。
沸水中加热5min。
待试管冷却后,比较两只试管中溶液颜色的变化。
实验设计
据资料二思考:如何使DNA从细胞里释放出来得到含有DNA的滤液?
利用什么原理可以使动物细胞或植物细胞破裂?
植物细胞可以加入一定量的食盐和洗涤
剂。
动物细胞吸水会胀破。这样能得到含
有DNA的滤液
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