海洋药用活性化学成分分离分析的基本方法.ppt

第二章海洋药用活性化学成分分离分析的基本方法
药物化学
海洋药物成分研究
结构鉴定
预鉴定
提取
纯化
分离
第一节预实验检测化合物成分
海洋天然产物经溶剂提取以后,经生物活性筛选确定活性部位,确定活性部位以后,要分离出药用活性成分,就要借助预实验,检测该活性部位含有哪种类型的化学成分,以便于选用合适的分离手段和方法进行下一步活性化学成分的分离和分析。
(1)一般检查:石油醚提取液滴于滤纸上。如滤纸上的油斑在大气中能挥发,就可能含有挥发油。如果油斑不消失,可能含有挥发油油脂或类脂体。
挥发油和油脂
(2)%荧光素水溶液:将石油醚提取液点在纸片上,%荧光素水溶液后,将纸片暴露在溴蒸气中(或碘蒸气中)。含有双键的萜类就呈黄色,背景很快就变为淡红色。
挥发油和油脂
(3)25%磷钼酸乙醇溶液:将石油醚提取液点在滤纸片上,喷洒25%磷钼酸乙醇溶液后,将纸片放在115~118℃烘箱中2min,对油脂、三萜及甾醇等呈蓝色,背景为黄绿色或藏青色。
挥发油和油脂
(1) 用PH试纸检查。生物样的水浸液和酒精提取液如呈酸性,就可能含有游离酸或酚性化合物。
有机酸
(2) 溴酚蓝溶液:点样于滤纸片上,%溴酚蓝溶液,溶于70%乙醇中,立即在蓝色的背景上显黄色的斑点。如觉得这样还不够明显,再喷洒氨水,然后暴露在盐酸气体中,背景逐渐由蓝色变为黄色,而有机酸盐的斑点仍然为蓝色。经过这样一个反复,用pH试纸难以肯定的有机酸样品也可检出。
有机酸
(1) 间二硝基苯试剂:使用前制备2%的间二硝基苯乙醇溶液和14%的氢氧化钾乙醇溶液的等量混合液。将样品点在纸上。喷洒上述试剂后,置空气中干燥约10min,就呈黄褐色或紫色。
甾体
(2) 三氯化锑溶液:先制备三氯化锑的氯仿饱和溶液。临用时加氯化亚砜(1/10~1/5 量),甾体化合物能呈各种颜色,若不加氯化亚砜,单独使用三氯化锑的氯仿溶液也能呈色。有些甾体样品需要加热100℃左右3~5min才能呈现各种颜色。(三氯化锑反应与强心甙、三萜类均能呈类似颜色)
甾体