苦参碱诱导人肺鳞癌SK.doc

苦参碱诱导人肺鳞癌SK.doc苦参碱诱导人肺鳞癌SK
【摘要】目的:探讨苦参碱(MT)诱导人肺鳞癌细胞株SK-MES-1凋亡作用及其抗肿瘤机制。方法:培养人肺鳞癌细胞株SK-MES-1,用不同浓度的MT处理SK-MES-1细胞,用MTT法检测MT对SK-MES-1细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;流式细胞术检测细胞相关凋亡蛋白Bcl-2、bax、caspase-3表达。结果:MT抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK-MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性。与对照组相比,苦参碱处理后的SK-MES-1细胞G0/G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降。Bax和capase-3表达增强,Bcl-2表达下调。结论:MT在体外能抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖,诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系,可能与抑制Bcl-2活性、激活bax和capase-3有关。
【关键词】苦参碱肺鳞癌细胞凋亡 SK-MES-1
Abstract: Objective: To explore the effects of matrine on the cell cycle and apoptosis in human lung squamous cell carcinoma SK-MES-1 cells and explore the possible mechanisms. Methods: The effect of matrine on cell proliferation atrine ined etry. The expression of caspase-3,Bcl-2 and Bax proteins etry. Results: Matrine inhibited the proliferation of SK-MES-1 cells in a dose-and time-dependent manner. pared atrine-treated cells shoent of 48 hours,the apoptosis rate e-dependent manner, ay be related to activation of caspase-3 and Bax and suppression of Bcl-2.
Key atrine;lung squamous cell carcinoma;cell apoptosis;SK-MES-1 cells
苦参碱(MT)是苦参根及苦豆子等中草药的活性成分, 是苦参碱类生物碱的代表,属于四环的噻嗪啶类,具有抗炎、免疫抑制、抗病毒、抗肿瘤等作用[1-2]。国内外研究发现MT对多种肿瘤细胞有一定的杀伤作用[3]。本研究为苦参碱对人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响, 探讨其对人肺鳞癌可能的作用机制。
1 材料和方法
主要试剂
苦参碱由西安林海生物工程有限公司提供。RPMI1640、胰蛋白酶及胎牛血清为Gibco产品。四甲基偶氮唑盐(MTT)、二甲基亚砜(DM-SO)、牛血清白蛋白(BSA)均为Sigma公司产品。Bcl-2、bax和caspase-3多克隆抗体购自cellsignal公司。
细胞培养
人肺鳞癌细胞株SK