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蟾蜍坐骨神经干电生理实验
Electrophysiology Experiment
on Toad’s Sciatic Nerve Trunk
陆源
浙江大学医学院
Introduction
1786年Galvani所做的双金属电极刺激蛙神经引起下肢收缩的实验
Galvani(1737~1798)意大利解剖医学家及物理学家
用检流计观察神经冲动实验
检流计,1848年德国人发明
1850年,用检流计测得蟾蜍坐骨神经干动作电位的传导速度为20~30m/s
electrode
1933年美国科学家 Gasser和 Erlanger用示波器对外周神经活动进行研究性总结,并发表了著名的论文《Electric signals of Nervous Activity》(1939年)。
用示波器做蛙坐骨神骨干动作电位实验
阴极射线示波器,1922年美录( Extracellular Recording)实验阶段
剑桥大学Hodgkin和Huxley应用金属微电极对乌贼巨神经纤维电活动进行系统研究, Hodgkin和 Katz提出离子假说。
1949年,凌宁和Gerard 发明玻璃微电极。电压钳和膜片钳将电生理研究推向分子水平。
用玻璃微电极做细胞电生理实验
m的玻璃微电极
细胞内记录( intracellular Recording)实验阶段
目的(objective) pound action potential ,CAP) ,研究蟾蜍坐骨神经干的电生理特性、双相动作电位形成机制及神经损伤、药物对神经兴奋传导的影响。
1. Materials and methods (材料和方法)
(laboratory animal) 蟾蜍(中华蟾蜍指名亚种,Zhuoshan Toad)
雄性蟾蜍皮肤光滑,前肢趾上有黑色婚垫,会鸣叫。雌性蟾蜍皮肤粗糙,无婚垫,不会鸣叫。
婚垫
雄蟾
雄蟾
雌蟾
1. Materials and methods (材料和方法)
(drug) 任氏液、2%普鲁卡因、3Mol 氯化钾
任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成,每升溶液含NaCl 、KCl 、CaCl2 ,、NaHCO3 、NaH2PO4 。任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。可用于蛙的组织、器官润湿和营养。
普鲁卡因:局部麻醉药,用于浸润麻醉、传导麻醉等。普鲁卡因与Na+通道内侧受体结合,使通道蛋白质构象变化,促使Na +通道失活状态闸门关闭。
Experimental apparatus (器材) RM6240生物信号处理系统(RM6240 biolgical signal collecting system )(成都仪器厂)、神经标本盒( nerve chamber )。
RM6240C微机生物信号处理系统
RM6240微机生物信号处理系统可以同时采集、放大、显示、记录、分析四路生物信号及一路刺激输出,12导联心电图输入记录,可用于人体和动物实验。仪器参数全程控设置,有多种数据分析功能和数据转换输出功能。
神经干标本盒。
S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+
S+、S-刺激电极,E接地电极,r1- 、r1+和r2- 、r2+引导电极,