高多糖多酚植物总RNA试剂盒（含DNaseⅠ）说明书.doc

高多糖多酚植物总RNA试剂盒(含DNaseⅠ)说明书
产品组成
高多糖多酚植物总RNA试剂盒
Cat. No.
5次制备
5113005
50次制备
5113050
过滤柱
核酸纯化柱
β-巯基乙醇
Buffer RCT
Buffer K
Buffer RDD
DNase I
Buffer WA
Buffer WBR
RNase-Free Water
说明书
5套
5套
50 μl
4 ml
2 ml
250 µl
28 µl
ml
ml

1份
50套
50套
500 μl
32 ml
20 ml
ml
270 µl
24 ml
ml
2 ml×3
1份
产品储存与有效期
DNase I 请置于-20℃贮存。
试剂盒如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持
杭州新捷生物科技有限公司研发部:e-mail: technical@, 电话:400-0099-857。
产品介绍
本产品适合从100-200 mg植物中分离纯化总RNA。植物组织经裂解液和氯仿抽提获得含有RNA的上清液,补加乙醇后加入纯化柱,RNA结合在纯化柱上,溶解的蛋白与PCR抑制物则被过滤除去。RNA经两种洗液洗涤后,用RNase-Free Water洗脱,即可用于RT-PCR,Northern blot,Dot blot,mRNA分离等各种分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品
氯仿、无水乙醇和70%乙醇。
RNase-free
移液器及吸头(为避免RNA酶的污染,建议选用含有滤芯的RNase-free移液器吸头)
一次性手套及防护用品和纸巾
台式小量离心机()
旋涡震荡器
无RNA酶使用的实验室
使用前准备
检查Buffer RCT是否有沉淀物析出,如有沉淀物请于60℃温育溶解后再使用。
如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
每1ml Buffer RCT中加入10µl M β-巯基乙醇,混合均匀。加入β-巯基乙醇的Buffer RCT一个月内使用不影响实验结果。
根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WA和Buffer WBR中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
因为唾液、皮肤上均含有RNA酶,所以RNA的提取的全过程都需要戴乳胶手套和口罩。
操作步骤:
1. 在研钵中加入约300-500 mg植物组织和液氮,将组织研磨至粉末状, ml 离心管称取100-200 mg研磨成粉末状的组织。
* 研磨组织时应及时补加液氮,避免组织融化,以免内源性的RNA酶恢复活性而降解RNA。
* Buffer RCT具腐蚀性,请戴防护用品进行操作。
2. 加入600 µl 已加入β-巯基乙醇的Buffer RCT,旋涡振荡直至组织全部溶解。
3. 加入600 µl氯仿,用力混合均匀,12000rpm离心5分钟。
µl上清,。
* 注意不要带入中间