上海第二医科大学
博士学位论文
多重耐药铜绿假单胞菌和不动杆菌β-内酰胺酶的研究
姓名:蒋晓飞
申请学位级别:博士
专业:临床检验诊断学
指导教师:倪语星
:驼献又小U献邮且桓鲆要的条件致病菌。多重耐药的铜绿假单胞菌和不动杆菌感染已经对临生素泵出机制使它天然对一些第三代头孢菌素中度敏感,而对第三代邗0访浮U庵质粒介导酶,但到目前为止,还没有在铜绿假单胞菌中发现质粒介导的酶。近年来,,铜绿假单胞传结构,是携带能识别并俘获移动性基因盒的位点特异性重组系统。。细菌用蚔系统鉴定确认;用纸片药物敏感试验和试验法检测其对抗菌药物的敏感性:用冻研究背景:.内酰胺类抗生素是目前治疗革兰阴性杆菌感染的最主要的药物。革兰阴性杆菌对邗0防嗫股啬鸵┑闹饕T蚴遣量和种类不断增多,革兰阴性杆菌中出现了种类众多的邗0访福铜绿假单胞菌和不动杆菌的耐药机制复杂。外膜渗透性降低及抗头孢菌素耐药最常见的原因是持续高产酶最早发现是染色体酶,后来又发现了一些与其同源性很高的酶种类不断增多,已经函盖了分子分类方案所有类型,。质粒和整合子的转移及获得其他耐药机制的能力加上细菌外膜渗透性降低使这些细菌的耐药问题更为复杂。已知绝大多数虼嬖谟谥柿V校蠖嗍葡妇⒉欢司粝妇图可位于质粒、染色体或转座子上,具有整合独立的耐药基因盒的能力。现在已经出现了产邗0访傅木晖蹦蚐、氨基糖苷类、氟喹诺酮的大量报道。。最近年,随着临床发现的邗0防嗫股氐氖使细菌的耐药性越来越强。铜绿假单胞菌和不动杆菌是院内感染中重床构成严重威胁。关键。试验菌株和实验方法:本研究的试验菌株收集于年隆月上质。
株同时还携带一个利福平耐药基因颂酋;R泼负鸵桓霭被擒株大肠埃希菌,株肺炎克雷伯菌携带型颉然后测定其序列。。。⑾/瓯欢司结论:上海瑞金医院出现了同时产生虴和可转移性因的多重耐药鲍曼不动杆菌。其中虴基因已经扩散到大肠因锢┰┰。虴基因存在于质粒中,但用纸片药物敏感试验和匝榉ḿ觳馄涠钥咕┪锏拿舾行裕挥枚橙诜ê超声破碎法提取酶粗制品;用三相水解试验和等电聚焦电泳法检测酶粗制品中邗0访覆⒍。用碱裂解法和煮沸法分别制备质粒和细菌总谰荼硇褪笛榻峁∮,阴性者检查其是否携带整合子,携带者用ɡ┰銎湔献尤可变区,克隆后测定其序列,并检测克隆株的药物敏感特性,。阴性者采用“鸟枪法”随机克隆可表达的邗0访富蚱危否存在于质粒中,用整合子跎负驼嫌枞ǹ杀淝鳯合子中,以确认邗0访傅淖R铺匦浴2捎肞法对上海瑞金医院年录渥≡夯颊吒髦至俅脖瓯荆芗株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行了啃突蛏覆椤实验结果:。。该菌虳类邗0访付嘀啬鸵┩碳俚グ巴毙鳲一型能水解卡巴培南的郆。内酰胺酶基因和可转移性虴基关键词:鲍曼不动杆菌;铜绿假单胞菌;§.内酰胺酶;基因型;蚢转移酶基因埃希菌和肺炎克雷伯菌中。。
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这种酶存在于染色体上,虽然与一些质粒介导酶同源性很细菌质粒和整合子的转移能力、获得其他耐药机制的能力以及外膜渗多重耐药铜绿假单胞菌和不动杆菌邗0访傅难芯胺酶。最近年,随着临床使用的。内酰胺类抗生素的数量和种类不断药铜绿假单胞菌已经对临床用药构成严重威胁。铜绿假单胞菌耐药机制复透性降低等使耐药问题更为复杂、抗感染治疗更为困难。现在已知的绝大多数蚨ㄎ挥谥柿V校蠖嗍葡妇⒉欢司粝妇增
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