系统性红斑狼疮SLE患者外周血淋巴细胞凋亡的分析.docx

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系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡的研究
中文摘要
本实验利用多种方法研究了细胞凋亡与系统性红斑狼疮(systemic
一’广
lupus erythematosus,SLE)的关系。(AV)和PI(碘化丙啶)及细胞表面标志三色荧光标记和流式细胞术检测了外周血淋巴细胞亚群发生的凋亡和淋巴细胞亚群百分比的改变。并在形态上,利用荧光显微镜观察到早期凋亡(¨,绿色)、晚期凋亡(A、,+PI+,绿色和红色双染)和死亡细胞(PI+,红色),另外在电镜和共聚焦显微镜下观查到了凋亡细胞的典型特征。新鲜血细胞凋亡检测结果表明,SLE患者 CD3+、CD4+、CD8+T细胞凋亡和死亡百分比均显著高于正常人(P<),
尤以CD4+T细胞最为显著(P<)。悃此,SLE患者CD4+T细胞占总淋
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巴细胞的百分比也显著下降,CD4/CD8比值明显倒置(P<)。用激素治疗后,T细胞的凋亡进一步升高(P<),但CD4+T细胞占总淋巴细胞的百分比也有所回升,CD4/CD8比值升高。而无论是激素治疗前或治疗后,SLE患者B细胞的凋亡或死亡百分比和正常相比均无明显差别(P>)。用SLE患者的血清培养,可使正常人或SLE病人的PBMC 凋亡百分比显著升高;, T淋巴细胞的凋亡百分比又显著降低,显示SLE血清中高水平IL-10可诱导T细胞发生凋亡。
用ELISA法检测上述培养细胞上清中的可漆洼Fas(sFas)、可溶性FasL
(sFasL)的水平,发现加SLE血清组的培养上清中sFas、sFasL的水
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平显著高于加正常人血清组;,两者的水平又会下降(P<)。、FasL的mRNA水平,初步证实SLE患者的淋巴细胞的Fas、FasL的mRNA水平明显高于正常人。荧光半定量 ,。以上结果说明,SLE患者体内T细胞,主要是CD4+T细胞凋亡和死亡率明显升高, 细胞免疫功能缺陷;用激素治疗可诱导T淋巴细胞进一步凋亡,但可通过诱导活化的免疫细胞进入正常的凋亡状态,恢复患者的T细胞亚群平衡;SLE患者T淋巴细胞凋亡增多, 有关,—FasL途径,诱导患者体内异常活化的细
胞发生凋亡(活化诱导的细胞凋亡,AICD))上述结果也提示凋亡在SLE
一/——:>
的发病机制方面至少可能是疾病发生、发展过程中的一个重要的继发性结果,诱导过度活化的免疫细胞发生凋亡从某些方面可以缓解病情,有利于疾病恢复;但过多的细胞凋亡,凋亡小体、核抗原的大量释放,也可进一步刺激自身抗体的产生,诱发肾损害,使疾病进程发生恶性循环。
【关键词】细胞凋亡;红斑狼疮; Fas;FasL;;T细胞;荧光
半定量RT—PCR
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Apoptos i S and system i C I upus erythematosus
Abst ract
We used three fluorescence and flow cytomitry to investigate the apoptosis of the subl})opulation of fresh lymphocytes and their roles in the pathogeneses of SLE pared wit}1 normal controls(NC).the apoptosis of T cells,especially CD4+T cells,increased significantly in SLE while the percentage of CD4+T cells and CD4/CD8 ratio decreased
91ucocorticoids(GC)treatment,the percentage of apoptic cells as well as CD4/CD8 ratio significantly apoptosis of T lymphcytes cultured with SLE serulTl were highly more than that cultured with NC serum,while an