任务二维生素C注射液的含量测定.ppt

维生素C的含量测定
组别:2组
组员:王鹏飞李东
于天齐苏剑
为什么要维生素C测定的含量?
精密量取本品适量,用水稀释制成每1ml中约含20μg的溶液,照肌苷项下的方法测定,计算,即得。
色谱分析法—高效液相色谱法、气相色谱法
举例—维生素C 注射液
怎么测定的含量?
一、背景知识
高效液相色谱概述
基本原理
液相色谱仪
二、 HPLC仪器
高压输液泵
梯度淋洗装置
进样装置
高效分离柱
高效液相色谱检测器
三、实验仪器、设备与药品
液相色谱仪测定的检测流程
数据采集与分析
测定维生素C的含量—高效液相色谱法
背景知识
概念
色谱法:利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术。
高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,缩写 HPLC),又译高效液相层析法,以前曾指高压液相层析法(high pressure liquid chromatography),用来分离液体混合物,以确认并量化各个成分的比例。
高效液相色谱仪
检测的分辨率和灵敏度高,分析速度快,重复性好,定量精度高,应用范围广。
适用于分析高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物。
价格昂贵,要用各种填料柱,容量小,分析生物大分子和无机离子困难,流动相消耗大且有毒性的居多。
背景知识
特点:
色谱原理
HPLC是利用样品中的溶质在固定相和流动相之间分配系数的不同,进行连续的无数次的交换和分配而达到分离的过程。
固定相材料
微粒硅胶:pH范围是 2~,若过碱(>pH8),硅胶会粉碎或溶解;若过酸(<pH1),键合相的化学键会断裂。
优点: ①硅胶的强度大;②微粒硅胶的小孔结构和表面积易人为控制;③化学稳定性好。
基本原理
①样品易溶,且溶解度尽可能大。
②化学性质稳定,不损坏柱子。
③不妨碍检测器检测,紫外波长处无吸收。
④粘度低,流动性好。
⑤易于从其中回收样品。
⑥无毒或低毒,易于操作。
⑦易于制成高纯度,即色谱纯。
⑧废液易处理,不污染环境。
流
动
相
选
择
原
则
基本原理—流动相
HPLC仪器:
液相色谱仪
(1) 高压输液泵
主要部件之一,压力:150~350×105 Pa。
为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(<10μm),液体的流动相高速通过时,将产生很高的压力,因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性