紫外-可见吸收与分子荧光光谱法
第四章
一分子吸收光谱的产生
1 分子能级
E = E0 +E平+E转+E振+E电子
ΔE = ΔE转+ ΔE振+ ΔE电子
分子吸收电磁辐射后的能量变化
§4-1 概述
Δ E电子> Δ E振> Δ E转
2 分子吸收光谱
红外光谱
(λ: -1000 µm)
电子能级跃迁
紫外、可见吸收光谱
(λ: 200-750 nm)
10-200 nm:远紫外;200-400 nm:近紫外
400-750 nm:可见光
振动能级与
转动能级跃迁
二紫外、可见吸收光谱
1 吸收曲线特点
连续的带状光谱
分子对辐射能的吸收具有选择性,吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。吸收曲线的形状、λmax及吸收强度等与分子的结构密切相关。
胆甾醇
异亚丙基丙酮
共轭基团相同的不同分子,紫外、可见吸收光谱很相似。
O=C–C =C
两分子具有相同的共轭基团
不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似,λmax不变,浓度越大,吸光度越大;在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大。
2 Lambert-Beer定律
K: 吸收系数
c 单位为g•L-1时,吸光系数 a (L•g-1•cm-1)。
b: 吸收光程(液层厚度),cm。
c: 吸光物质浓度。
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