脯氨酸的检测方法
1. 原理
样品用茚三酮处理,样品中的脯氨酸反应生成橙色物质,在520nm检测吸光度,并作空白对照实验。
2. 应用范围
本方法适用于蜂蜜、果汁和浓缩汁中的脯氨酸的检测。本方法在其它方面的应用必须经过个别论证。
3. 试剂及仪器
3%茚三酮2-甲氧基乙醇溶液( 2-甲氧基乙醇,每天保持新鲜,即现用现配)
2-甲氧基乙醇
蚁酸(96%),即甲酸
异丙醇(2-丙醇)水溶液:水:丙醇= 1:1
15ml旋盖玻璃离心管(确保离心管的边缘没有缺口,将有缺口的离心管丢掉)
分光光度计,检测吸光度设定在520nm下
1cm 玻璃比色皿
4. 样品准备
,梨和大部分浆果的果汁用单一浓度(即原果汁浓度),橙汁用1:20的水进行稀释。其它的果汁应进行适当的稀释,以保证稀释后的样品中的脯氨酸的含量低于50mg/L(见稀释表)。浓缩果汁用水稀释到单一浓度,然后再进一步进行适当的稀释。蜂蜜的稀释,。
将样品在分析之前离心5min左右,去除悬浮物,取上清液进行分析。
样品类型
稀释比例
颜色空白
期望值
Apple 苹果
1:1
yes
Apricot 杏
21:1
yes
Aronia 野樱莓
1:1
yes
Banana 香蕉
1:1
yes
Blackberry 黑莓
1:1
yes
Cherry 樱桃
1:1
yes
Cranberry 蔓越莓
1:1
yes
Grape 葡萄
16:1
yes
Grapefruit 柚子
21:1
no
Guava 番石榴
3:1
yes
Kiwi 泥猴桃
1:1
yes
Lemon 柠檬
21:1
no
Lime 酸橙
21:1
no
Mandarin 中国柑桔
21:1
no
Mango 芒果
1:1
yes
Nectarine 油桃
21:1
no
Orange 柑桔
21:1
no
Papaya 番木瓜
1:1
yes
Passion Fruit 西番莲
1:1
yes
Peach 桃
6:1
yes
Pineapple 菠萝
1:1
yes
Plum 李子
7:1
yes
Prune 西梅
16:1
yes
Raspberry 悬钩子(树梅)
5:1
yes
Strawberry 草莓
1:1
yes
Tangerine 橘子
21:1
no
Tomato 番茄
1:1
yes
5. 标准溶液的制备
(500mg/L):。此贮备溶液冷藏存放,每月重新配置一次。
50mlg/L准工作溶液:每天配置一次,取5ml脯氨酸贮备溶液,用水定容至50ml。用该溶液作为分析用的标准溶液。
6. 结果判定
将离心管编号,并设计样品编号与离心管标号的对照表格。按下表,向离心管内移取相应溶液:
*颜色水
样品空白标准空白
茚三酮溶液 mL ------- mL
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