ack红细胞裂解液(acklysisbuffer).docx

北京雷根生物技术有限公司
ACK 红细胞裂解液 (ACK Lysis Buffer)
简介:
在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如 ACK Lysis
Buffer 、Tris- 氯化铵红细胞裂解液、 Gey's Lysis Buffer 。ACK 红细胞裂解液 (Red Blood Cell
Lysis Buffer) 也称 ACK Lysis Buffer ,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或
血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为 NH 4 Cl。
Leagene ACK Lysis Buffer 经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴
细胞 (Lymphocyte) 或其它有细胞核的细胞。对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽
类的红细胞, 效果不佳,裂解类似细胞时, 不建议采用。 本裂解液经过滤除菌, 经过 ACK Lysis
Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白
的提取及各种常规的分析和检测。
组成:
编号
CS0001 CS0001 Storage
名称
ACK Lysis Buffer 100ml 500ml 4 ℃
使用说明书 1 份
自备材料:
1 、 胰蛋白酶
2 、 离心机
3 、 PBS、HBSS 、生理盐水或无血清培养液
操作步骤 (仅供参考 ):
( 一) 组织细胞样本的常规操作
1 、制备细胞悬液 : 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞
悬液,离心弃上清。
2 、裂解 : 加入 3~ 5 倍细胞沉淀体积的 ACK Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解 1 ~ 2min 。
本操作步骤在 4 ℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3 、离心 :离心,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4 、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤 2 和步骤 3 各一次。
5 、洗涤:根据实验要求加入适量 PBS、 HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬
沉淀。离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的 PBS、HBSS 、生理盐水或
无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的 5 倍以上。
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6 、如有必要,重复上述步骤 5 一次,共洗涤 1 ~ 2 次。
7 、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
( 二) 组织细胞样本的快速操作 (无需洗涤 )
1 、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞
悬液,离心弃上清。
2 、裂解:加入 ACK Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在 4℃条件下操作更
佳,亦可在室温下操作。
3 、加入 PBS、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。
4 、离心,弃红色上清,本离心步骤亦可在室温下操作。
5 、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤 2 ~4 各一次。
6 、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
( 三) 血液样本的常规操作
1 、取新鲜抗凝血,离心,弃上清。
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