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二0 年月
福建医科大学
硕士学位论文
FZD2、FZD3基因对涎腺腺样囊性癌增殖及侵袭能力的影响
姓名:郑斐斐
申请学位级别:硕士
专业:口腔临床医学
指导教师:卢友光
2011-05
福建医科大学硕士论文 FZD2、FZD3 基因对涎腺腺样囊性癌增殖及侵袭能力的影响
FZD2、FZD3 基因对涎腺腺样囊性癌增殖及侵袭能力的影响

中文摘要
涎腺腺样囊性癌是最常见的腮腺恶性肿瘤之一,其特有的侵袭转移方式造成
涎腺腺样囊性癌治疗后易复发,至今仍缺少有效的防治措施。从分子水平寻找参
与涎腺腺样囊性癌侵袭、转移相关分子,将为涎腺腺样囊性癌的诊断、治疗以及
预后判断提供新的依据。
目的在本课题组前期证实 FZD2、FZD3 基因与 发生、转移有关,可能
起到抑癌作用的基础上,进一步探讨 FZD2、FZD3 基因表达对涎腺腺样囊性癌
细胞增殖及侵袭能力的影响。
方法第一部分针对 FZD2、FZD3 基因序列设计合成 siRNA,转染-M 细
胞,实验分成四组:siRNA-FZD2 组、siRNA-FZD3 组、NC 阴性对照组和空白
组。siRNA 转染后采用蛋白免疫印迹法检测 FZD2、FZD3 蛋白的表达,K-8
试剂盒观察-M 细胞增殖情况,应用侵袭小室分析细胞侵袭特征。
第二部分采用 Ad-EasyTM 系统,使 FZD2、FZD3 基因在大肠杆菌中同源
重组,构建 Ad-FZD2、Ad-FZD3 腺病毒载体,酶切鉴定正确后以脂质体转染的
方式在 AD293 细胞中包装,测定病毒滴度后选择最适感染强度感染-M 细
胞。采用蛋白免疫印迹法检测感染后 FZD2、FZD3 蛋白的表达,K-8 试
剂盒观察-M 细胞增殖情况,应用侵袭小室分析细胞侵袭特征。
结果第一部分 siRNA-FZD2、siRNA-FZD3 转染-M 细胞 48h 后蛋白免疫
印迹显示,与阴性对照组比较 siRNA-FZD2、siRNA-FZD3 组蛋白表达量明显减
弱。K-8 法观察发现,siRNA 干扰后的-M 细胞增殖曲线位于对照
组-M 细胞增殖曲线之上,-M 细胞增殖能力明显增强。侵袭小室结
果显示 siRNA 干扰后的-M 细胞比对照组-M 细胞穿过小室的数目
明显增多,-M 细胞侵袭能力增强。
第二部分重组腺病毒以 MOI=100 感染-M 细胞 72h 后蛋白免疫印
迹显示,与 GFP 阴性对照组比较 Ad-FZD2、Ad-FZD3 蛋白表达量明显增强。应
K-8 法观察发现,腺病毒感染后的-M 细胞增殖曲线位于对照组
-M 增殖曲线之下,-M 增殖能力明显降低。侵袭小室结果显示过表
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福建医科大学硕士论文 FZD2、FZD3 基因对涎腺腺样囊性癌增殖及侵袭能力的影响
达 FZD2、FZD3 的-M 细胞比对照组-M 细胞穿过小室的数目明显减
少,-M 细胞侵袭能力降低。其结果与 siRNA 干扰的结果一致。
结论 FZD2、FZD3 基因在涎腺腺样囊性癌增殖及侵袭中起关键作用,可能对涎
腺腺样囊性癌有一定的抑制作用。进一步研究,可以为涎腺腺样囊性癌预后判断
和基因治疗寻找新的靶点提供依据。
关键词涎腺腺样囊性癌; Wnt 信号通路; FZD2 FZD3; 细胞增殖; 侵袭能力






















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福建医科大学硕士论文 FZD2、FZD3 基因对涎腺腺样囊性癌增殖及侵袭能力的影响
Effects of FZD2 and FZD3 genes on the Proliferation and
Invasiveness of Salivary Adenoid Cystic Carcinoma cell

ABSTRACT
Salivary Adenoid Cystic Carcinoma () is one of the mon
malignant tumors in parotid gland. It tends to be frequently recurrent after surgery
due to the special invasiveness and metastasis ability. Novel moleculars related to
the invasiveness and metastasis of can help us to seek for the met