分离酵母拮抗菌防治水果采后病害的研究.ppt

分离酵母拮抗菌防治水果
采后病害的研究
水果在采后储藏过程中,很容易受到病原菌的侵染造成腐烂,引起大量经济损失,而生物防治以其高效性能和无公害成为控制水果采后病害的一种国际趋势。本文对酵母拮抗菌防治水果采后病害进行了研究。
一、材料和方法
1、酵母拮抗菌的分离
1、1水果表面优势酵母菌的收集
精选水果,取病部表层组织20g作为样品,将样品放入研钵中,%的无菌盐水处理,并杵烂,放入三角瓶(灭菌)中,,制成100ml均匀分布的悬浮液,,并加入50-100ppm 利福霉素(抑制细菌生长)。取1ml样品悬浮液, 加入含有10ml水果汁液的试管中,再用高压灭菌后的葡萄糖溶液(浓度为200g/l)加到试管的一半(为了降低水活度),25℃培养1天。
1、2拮抗酵母菌的挑选
培养好的样品,稀释10000-100000倍,用PDA培养基(加入50-100ppm利福霉素)涂平板,并加入灰霉菌(Botrytis cinerea)的孢子悬液(10-3 ,10-4 ),在25C培养3天。从灰霉菌(Botrytis cinerea)长势稀少或不长的平板中挑选菌落,纯化,以备鉴定和更深入的测试。
2、水果采后病原菌的分离
将水果病部菌丝进行培养和纯化,以备鉴定和更深入的测试。
3、防治效果测定
优选水果,表面消毒,在果实表面打孔造成伤口,接种酵母拮抗菌(108CFU/ml),用水果病原菌孢子悬浮(105CFU/ml)进行挑战接种,置于15℃下培养,4天后测定病斑直径,确定防治效果,每处理重复3次。
二、结果与分析
1、拮抗酵母菌株的筛选
1、1 从水果中分离纯化的90个拮抗酵母菌株,对黑腐菌引起甜瓜病害的防治效果表明(表1-表7):HM001、HM002、HM003、HM007、HM008、HM010、HM012、HM013、HM014、HM016、HM018、HM019、HM020、HM023、HM024、HM025、HM027、HM028、HM029、MY015、MY017、MY018、MY020、MY021、MY022、MY023、MY026、MY027、MY028、MY029、MY030、MY031、MY032、MY033、PH013、PH014、PH015、PH017、PH019、PH020、PH021、PH022、PH023、PH024、PH025共45个拮抗酵母菌株对黑腐菌有可见抑制作用。
表1拮抗酵母菌株对黑腐菌引起甜瓜病害的防治效果1
致病菌
对照病斑直径(mm)
HM 001
HM 002
HM
003
HM
013
病斑直径(mm)
黑腐菌
20
13
9
13
11
表2 拮抗酵母菌株对黑腐菌引起甜瓜病害的防治效果2
致病菌
对照病斑级别
HM
007
HM
008
HM010
HM012
HM013
HM014
HM016
HM018
病斑直径级别
黑腐菌
4
2
3
3
2
2
3
2
3
注:分级(0:病原菌不能生长;1:抑制作用较强;2:有可见抑制作用,病原菌生长量下降;3:稍有抑制作用,病原菌生长基本正常;4:无抑制作用)
表3拮抗酵母菌株对黑腐菌引起甜瓜病害的防治效果3
致病菌
对照病斑直径(mm)
HM019
HM020
HM023
HM024
HM025
HM027
HM028
HM029
病斑直径(mm)
黑腐菌
20
10
5
14
16
8
7
6
13