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核医学
第五章体外分析技术
福建医科大学附属三明第一医院核医学科
陈强
1 综述3
2 放射免疫分析 6
3 放射免疫分析法的建立和基本试剂14
4 分离方法和数据处理25
5 质量控制29
6 免疫放射分析法35
7 非放射性免疫标记分析技术42
8 放免检测的临床应用46
体外分析技术
核医学体外分析技术主要是利用放射免疫分析技术或其派生的相关技术,以特异性结合的免疫反应为基础,在体外进行,对机体内物质的种类和含量进行的分析测定。
美国学者Berson和Yalow
1953---1956 使用放射性碘标记胰岛素
1958 创建放射免疫分析法
优点:灵敏度高,特异性强,操作简便,成本低
1977 两人共同获得诺贝尔生物医学奖
以放射免疫分析法为基础发展出三大类分析方法
1 竞争性受体(蛋白)结合分析法,用体内天然存在的特异结合体代替抗原-抗体。
2 荧光,酶,化学发光,稀土元素等标记的免疫分析法
3 放射性非竞争结合分析法
放射免疫分析 (radioimmunoassay,RIA)
三个名词:
1 非标记抗原(待测物)
2 标记抗原
3 抗体
放射免疫分析(RIA)的基本原理:
定量的放射性核素标记的抗原(radionuclide labeled antigen)和未知量的非标记抗原(unlabeled antigen)(标准抗原或被测抗原)同时与限量的特异性抗体(specific antibody)petitive immune binding reaction)由于标记抗原与抗体的结合量与非标记抗原的含量之间,存在竞争抑制的函数关系,可依据反映这一函数关系的标准曲线,求得待测抗原的含量。
RIA的必备条件:

反应式
Ag + Ab(限量) Ag-Ab + Ag
          +
*Ag(限量)
             
*Ag + *Ag-Ab
式中:*Ag为标记抗原,Ag为非标记抗原,Ab为特异性抗体,*Ag-Ab为标记抗原抗体复合物,Ag-Ab为非标记抗原抗体复合物。
由于*Ag与Ag的免疫活性完全相同,对Ab具有同样的亲和力,当*Ag和Ab为恒定量,Ag和*Ag的总量大于Ab上的有效结合点时,*Ag-Ab的形成是随着Ag量的增加而减少,剩下来的未结合或游离的*Ag则随着Ag量的增加而增加,petitive binding reaction),因此测定*Ag-Ab或*Ag即可推出被测的Ag量。如下图: