高考生物实验(16个).doc

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一、观察核酸在细胞中的分布
材料:人的口腔上皮细胞试剂:甲基绿、吡罗红混合染色剂
原理:甲基绿能使DNA呈现绿色,吡罗红能使RNA呈现红色,因此利用这两种染色剂将细胞染色,可以真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
步骤:
1、取材
①滴:%的NaCl溶液(保持细胞渗透压);
②刮:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;
③涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;
④烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2、水解
①解:将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸(改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合)的小烧杯中,进行材料的水解;
②保:将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。
3、冲洗涂片
①冲:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒钟;
②吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4、染色
①染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟;
②吸:吸去多余染色剂;
③盖:盖上盖玻片。
5、观察
①低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;
②高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色
注意事项: 盐酸的作用——改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
二、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质。
1、还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)的检测
试剂:斐林试剂(甲液: 乙液:)
颜色变化:浅蓝色─→ 砖红色沉淀
步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
注意事项:①甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中,现配现用 ② 必须用水浴加热
2、脂肪的鉴定
 试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液  颜色变化:橘黄色或红色
步骤: 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
               ↓
              染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
              ↓
           制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
              ↓
           镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
注意事项:①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。
        ② 50%酒精的作用是:洗去浮色
        ③需使用显微镜观察 
3蛋白质的鉴定    颜色变化:变成紫色
试剂:双缩脲试剂( A液: B液: )
步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)
注意事项:①先加A液1ml,再加B液4滴②蛋清要先稀释
4淀粉的检测和观察
试剂:碘液颜色变化:变蓝
三、使用显微镜观察多种多样的细胞。
高倍镜的使用步骤
(1)在低倍镜下找到物像,将物像移至视野中央。(2) 转动转换器,换上高倍镜。
(3) 调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。(4) 调节细准焦螺旋,使物像清晰。
显微镜的放大倍数=目镜的放大倍数×物镜的放大倍数
面积的放大倍数=显微镜放大倍数的平方。
显微镜下的物像与实际上下,左右相反。
四、用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体。
1实验原理
 (1)叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。
(2)线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,健那绿染液(活细胞染液)能专一性使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而线粒体周围的细胞质中为无色的状态。通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
2材料  藓类、菠菜或黑藻的叶,人的口腔上皮细胞。
3方法步骤:
1、观察叶绿体
低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察。
2、观察线粒体
取材→染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察。
五、观察植物细胞质壁分离和复原
1原理:植物细胞的吸水和失水
细胞内的液体环境主要指的是液泡里面的细胞液