超滤管使用相关:
使用
特性
样品损失
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如何正确使用:
加入样品离心吸出
使用之前:用ddH2O润湿,冰浴或冰箱预冷几分钟。
加入样品:摆动桶离心机 15ml
固定角转离心机 12ml
离心:摆动桶离心机 4000g
固定角转离心机 5000g
离心时,膜和转轴垂直(角转离心机)
吸出:离心完毕后立即吸出,将两侧膜冲洗下。
用完后,水洗并离心;管内装ddH2O保存,一旦开始使用,切勿使膜变干。
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超滤管的一些特性:
可浓缩80倍;
对各种物质的耐受性:
尿素<=8M 咪唑<=100mM
蛋白大小是超滤管孔径的2倍
除浓缩外,还可更换缓冲液,去除盐分。
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样品损失:
吸附损失:
及时吸出,将两侧膜洗下;
离心时间过长:
产生沉淀,使蛋白损失(换试剂);
滤出去:用小孔径超滤管。
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