葡萄糖耐量的测定.ppt

葡萄糖耐量的测定
组员:吴雪张沛露
李建勋范鎏万倩
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葡萄糖的性质
物理性质:
1、旋光性 D-葡萄糖在20摄氏度光时的比旋光度数值为+.
2、溶解度在20摄氏度时单一的葡萄糖溶液最高浓度为50%。
3、甜度 a-D-.
4、黏度葡萄糖的黏度随着温度的升高而增大。
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化学性质:
(1)分子中的醛基,有还原性,能与银氨溶液反应:CH2OH-(CHOH)4-CHO+2[Ag(NH3)2]++2OH-==CH2OH-(CHOH)4-COONH4+2Ag↓+H2O+3NH3,被氧化成葡萄糖酸三维模型
(2)醛基还能被还原为己六醇
(3)分子中有多个羟基,能与酸发生酯化反应
(4)葡萄糖在生物体内发生氧化反应,放出热量。
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测定血清葡萄糖的方法
血糖是指血中的葡萄糖,血糖是临床上的习惯简称。血糖测定对糖尿病的诊断,疗效观察等均具有重要的意义。其测定方法主要有邻甲苯胺法、葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法、酶法等。
1、酶比色法
由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。根据Lambert-Beer定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析
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2、酶电极法
葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下催化β─D葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化,生成D─葡萄糖酸─δ─内酯和过氧化氢。过氧化氢与过氧化氢型电极接触产生电流。该电流值与β─D─葡萄糖的浓度呈线性比例,在酶电极葡萄糖分析仪上直接显示葡萄糖含量。
3、GOD-POD法
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1、掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理
2、掌握血糖变化的临床生理意义
3、掌握口服葡萄糖耐量实验的原理、适用人群及临床意义
实验目的
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实验原理
葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
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试剂与器材
5ml移液管、50ul或100ul微量可调式移液器、721E型分光光度计、1cm比色皿、37℃恒温水浴锅
(PH=)、酶试剂、酚溶液、酶-酚混合试剂、12mmol/L苯甲酸钠溶液、葡萄糖标准储存液(100mmol/L)、葡萄糖标准工作液(5mmol/L)
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实验步骤
项目
空白管
标准管
测定管
血清/ml
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葡萄糖标准液/ml
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蒸馏水/ml

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酶酚混合试剂/ml



一、取试管三只,按表操作
混匀,置于37℃水浴中,保温25min,在波长510nm处比色,以空白管调零,读取标准管及测定管吸光度。
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二、口服葡萄糖耐量试验方法及正常值
1、受试者试验前1天晚餐后即不再进食(即空腹10-14h)
2、次晨空腹抽静脉血2ml,测定其血糖含量;
3、将75g葡萄糖溶于200-300ml温开水中,令受试者5min内服下,、1h、、2h各抽血一次,做血糖定量测定;
4、将各次测定结果与相应的时间制成糖耐量曲线图,以便进行分析。
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