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文档分类:文学/艺术/军事/历史 | 页数:约1页 举报非法文档有奖
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安徽农业科学�����皋�
���—�������弓������—�����
. �—�����游离出来,其中���因可溶解细胞膜中的脂溶性物质,从而�
使细胞膜破裂,有利于���的释放。与用玻璃珠破碎的方�
法比较,经处理后滞留于残余物中的细胞从��%减少至�
��%����.且使���的破碎率减少。珠磨振荡法的破壁效果较�
������——�好,偏倚性也小,但产物杂质多,片段易被振碎,大片段少��;�
�������——�冻融法由于操作过程中间扰动较少,因此提取到的大片段�
���多,且纯度较高,适合于需要大片段���的制备。溶菌�
������——�酶应用较为普遍,它不仅有助于细胞裂解,而且还可以与腐�
殖酸结合,提高所提���的纯度。�
该试验结果表明,提取缓冲液�蛋白酶�����提取法�
图���种提取方法获得的���样品的��������扩增条带�
凝胶电泳图�提取的活性污泥细菌���的����值大于�.��,电泳�
���.�����������������������������������������������图显示有大片断���的存在且拖带较少;通过���扩增�
������������������������������������������������
所得的���的纯度检测结果显示,扩增出了条带分子量约�
样品的������������扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳,检测�为��������的特异性条带;溶菌酶����一蛋白酶提取法提取�
结果如图�所示。从图�可以看出,用提取缓冲液�蛋白酶�的���效果不好,点样孔较亮,可能存在一定的蛋白质残�
�����提取法获得���样品扩增出了条带分子量约为�留,或其他杂质等,且通过���没有扩增出特异性条带。但�
��������的目的条带,而用溶菌酶����一蛋白酶提取法获得�溶菌酶�����要白酶提取法对试验条件的要求不高,离心最�
的���样品扩增后没有得到预期条带,需进一步纯化回�高转速只需�������/���,在一般的实验室条件下都可以运�
收。这与前面�种检测方法所得的结果一致。由此说明,用�用,对样品纯化后仍可以进行后续试验。�
提取缓冲液�蛋白酶�����提取法提取的���可不经过�参考文献�
纯化而直接进行扩增。�’�������������,�����������.��������������������������������
�结论与讨论�����������������������:��������,�������������������������.�������,�
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从活性污泥中提取���的各种方法的差别在于细胞�
【������������,���������.���������������������������������������
破壁的方式不同。常见的细胞破壁方式主要有:物理法,如������������.�����������������������,����。��:���—���.�
冻融法、超声法、珠磨匀浆法、液氮碾磨法等;化学法,其常����赵勇,周志华,

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  • 时间2015-10-01
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