bd流式细胞仪.doc

目录简介流式细胞仪……………………………………………………3流式细胞仪的临床检验项目 淋巴细胞亚群分析……………………………………………………………4 肿瘤细胞DNA检测分析………………………………………………………5 白血病及淋巴瘤免疫分型……………………………………………………6 残余白血病检测……………………………………………………………..6 网织红细胞计数……………………………………………………………..7 造血干细胞计数……………………………………………………………..7 血小板疾病及活化血小板检测……………………………………………..8 HLA-B27检测…………………………………………………………………8器官移植的配型及免疫状态监控…………………………………………..9AIDS诊断及治疗监控……………………………………………………….9流式细胞仪的临床/医学研究……………………………………10流式细胞技术的发展及国内现况……………………………….10建议流式细胞仪之机型----BD公司FACSCalibur 仪器主要特点……………………………………………………………..11 配套设施(计算机、软件、试剂、样本制备仪、售后服务)………..12 仪器主要技术参数…………………………………………………………15BD公司全球及中国业务介绍BD公司流式细胞仪培训计划BD公司推荐配置单BD公司仪器与其他厂家仪器比较表简介流式细胞仪(一)流式细胞仪概念流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种对处在液流中的细胞或其它生物微粒(如细菌)逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。简言之,流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质,如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测量并可分类收集的高技术,FCM以其快速、灵活、大量、灵敏和定量的特色,广泛应用于基础研究和临床实践各个方面,包括细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等,在各学科领域发挥着重要的作用。(二)原理待测样本的细胞悬液,在鞘液的包围和约束下,细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出,形成细胞液柱。当液柱通过检测区,在入射的激光束照射下产生前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),它们分别反映细胞大小和颗粒度,根据这些特性可以将细胞分类。经一种或几种特殊荧光标记的样本,在激光束的激发下所产生的特定荧光,可被光学系统检测并输送到计算机进行分析,得到细胞相应的各种特性。(三)流式细胞仪检测的细胞特性细胞结构组成细胞功能大小细胞表面、胞浆、核特异性抗原粒度细胞活性DNA、RNA含量胞内细胞因子蛋白质含量激素结合位点钙离子、pH值、膜电位酶活性流式细胞仪的临床检验项目目前在国内最常见的临床应用有两大类:一为肿瘤细胞的DNA含量析;另一为细胞表面的表型测定,包括淋巴细胞亚型分析、免疫功能监测、白血病和淋巴瘤免疫分型、残余白血病检测、以及HLA-B27组织抗原检测等等。1、淋巴细胞亚群分析淋巴细胞亚群分析可以通过相对计数、绝对计数与率的变化监控疾病状态下的免疫状况(如肿瘤、感染性疾病、免疫性疾病等),以此辅助诊断、追踪病情发展及决定用药时机。检测原理:利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合,再配合多色荧光染料,即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来,进而得到各亚群的相对比例。最常检测的亚群包括T细胞(CD3)、B细胞(CD19)、NK细胞(CD16+56)、辅助性T细胞(CD3+CD4+)和抑制性T细胞(CD3+CD8+)等。应用实例:SimulSET系统利用CD14/CD45设门技术精确检测淋巴细胞亚群比例。*其中绿色细胞群体为淋巴细胞,红色为单核细胞,蓝色为粒细胞。DNA分析肿瘤细胞的DNA倍体分析是流式技术另一重要应用,临床上可对一些恶性肿瘤进行早期诊断,跟踪随访和早期治疗,大大提高一些肿瘤的治愈率和生存率。检测原理:正常人体细胞的DNA含量是二倍体,细胞群体具有特定的增殖比例。通过检测细胞的DNA含量和增殖比例,可以了解细胞群体的倍体性和增殖能力。具体操作时,先将实体组织制备成单细胞悬液,用固定或去污剂在细胞膜上打孔,使DNA特异的荧光染料如PI(碘化丙啶)导入细胞核,PI和DNA缄基对特异结合后上机检测PI的荧光强度,并进行数据分析。应用实例:乳腺癌病人的手术标本分析图。*其中红色群体为二倍体,黄色群体为异倍体。白血病和淋巴瘤免疫分型正常白细胞在其分化过程中,随着系列的不同、成熟阶段的差异,会在细胞膜表面表达不同的分化抗原。白血病细胞则在癌变的过程中,丧失了正常细胞底系列专一性和分化阶段规律性,在本质上有别于正常骨髓细胞。应用此特点可进行免疫表型分析,以