多糖的试验实验报告.docx

多糖的试验实验报告综述摘要: 一、什么是多糖 n表示。多糖不是一种纯粹的化学物质,而是聚合程度不同的物质的混合物。二、多糖的结构多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成,是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。多糖多糖在自然界分布极广,亦很重要。有的是构成动植物骨架结构的组成成分,如纤维素;有的是作为动植物储藏的养分,如糖原和淀粉;有的具有特殊的生物活性,像人体中的肝素有抗凝血作用,肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。多糖的结构单位是单糖,多糖相对分子质量从几万到几千万。结构单位之间以苷键相连接,常见的苷键有α-1,4-、β-1,4-和α-1,6-苷键。结构单位可以连成直链,也可以形成支链,直链一般以α-1,4-苷键和β-1,4-苷键9如纤维素)连成;支链中链与链的连接点常是α-1,6-苷键。由一种类型的单糖组成的有葡萄糖、甘露聚糖、半乳聚糖等,由二种以上的单糖组成的杂多糖有氨基糖的葡糖胺葡聚糖等,在化学结构上实属多种多样。就分子量而论,有从万个分子组成的到超过106个的多糖。比10个少的短链的称为寡糖。不过,就糖链而论即使是寡糖,在寡糖上结合了蛋白质和脂类的,就整个分子而论,如果是属于高分子,则从广义上来看也属于多糖,因此特称为复合多糖或复合糖质。[1] 三、多糖的功能通常具有贮藏生物能和支持结构的作用。不均一多糖通过共价键与蛋白质构成蛋白聚糖发挥生物学功能,如作为机体润滑剂、识别外来组织的细胞、血型物质的基本成分等。多糖类化合物广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中,是由醛基和酮基通过苷键连接的高分子聚合物,也是构成生命的四大基本物质之一。细胞膜和细胞壁的多糖成份不仅是支持物质,而且还直接参与细胞的分裂过程,在许多情况下成为细胞和细胞,细胞和病毒,细胞和抗体等相互识别结构的活性部位。生物合成通常是由结合在细胞膜质上的转糖基酶进行,利用各种糖苷作为前体。在细菌细胞壁和聚多糖的生物合成中,多萜醇衍生物作为中间体参与反应。另一方面,在分解过程中,有对糖链的糖排列次序和键的性质有特异性的多种糖苷酶参与。动物细胞中则多以溶酶体系统的酶存在。此外,常能看到因缺损这些酶中的某种所导致的遗传病。这是显示多糖代谢重要性的典型例子。[1] 20世纪50年代发现真菌多糖具有抗癌作用,后来又发现地衣、花粉及许多植物均含有多糖类化合物,并进行分离提纯,确定了其化学结构、物理化学性质、药理作用,尤其对多糖类化合物的抗肿瘤和免疫增强作用进行深入研究。四、多糖的性质五、多糖的提取方法 1、试验目的通过本试验,掌握多糖的性质,测定方法的基本原理,熟悉S54紫外可见分光光度计,KQ5200超声波清洗器的使用方法。 2、试验原理植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白质存在的影响,3、设备试剂:葡萄糖,苯酚,碳酸氢钠,浓硫酸,乙醇等。仪器:粉碎机、S54紫外可见分光光度计,电子分析天平,KQ5200超声波清洗器。提取:称曲=取粉碎饮片,加入300ml蒸馏水浸泡4h,加热回流提取2次,|次。合并水提液,过滤减压浓缩至100ml,静置,离心,上清液减压浓缩至100ml,再向其中加入3倍量95%的乙醇,于4度冰箱中静置18h,离心弃上清液,收集白色沉淀物,冷冻干燥,得粗多糖。4多糖含量的测定5%苯酚试剂的配制取苯酚,加铝片和NaHCO3,常压蒸馏,收集182度馏分,称取,加水150ml溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。葡萄糖标准液储备液的配制精确称取150度干燥恒重的葡萄糖,加适量水溶解,转移至50ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀配成浓度为1mg|ml葡萄糖标准储备液备用。标准曲线的制备葡萄糖标准储备液1mg|ml,移取0,,,,,,,分别定容于50ml容量瓶中,制备成标准使用溶液,分别取1ml标准使用溶液置试管中,加入1ml5%苯酚溶液,迅速加入5ml浓硫酸,振荡放置15min,置于沸水浴中加热30min,冷水冷却至室温。用紫外分光光度计测定吸光度A,以吸取光度对浓度做图校准曲线,计算回归方程。最大吸收波长的选择精密移取1ml|ml,葡萄糖标准液3ml,加入1ml5%苯酚溶液,迅速加入5ml浓硫酸,振荡,放置15min,置于沸水浴中加热30min,冷却至室温,采用蒸馏水同法做空白参比溶液,分别在480,485,495,500nm处测定吸收光度,绘制曲线,找出最大吸收波长。换算因子的测定取粗多糖样品10mg置100