《标准QCAMQCA培训》PPT课件.ppt

动物源食品中喹喔啉-2-羧酸和3-甲基喹喔啉-2-羧酸残留检测-,作为饲料添加剂用于育成猪,具有抗菌促生长作用。卡巴氧在动物体内迅速脱氧转化成其它代谢产物,其中消除最慢的为喹喔啉-2-羧酸(QCA),作为残留标示物;喹乙醇在动物体内的代谢过程和卡巴氧类似,转化为脱一氧和脱二氧化合物后,进一步代谢为3-甲基喹喔啉-2-羧酸(MQCA),在动物体内残留时间最长,规定其为残留标示物。因卡巴氧和喹乙醇的毒副作用,1998年欧盟禁止对其使用。标准由来农业行业标准(农财发[2005]58号)制定和修订项目中华人民共和国农业部公告第781号(公告-3-2006)试剂材料标准品及标准溶液甲醇、乙酸乙酯、偏磷酸、甲酸、磷酸、磷酸氢二钾、偏磷酸甲醇溶液、氢氧化钠溶液、甲酸甲醇溶液、磷酸缓冲液、氢氧化钠-甲醇溶液试剂精确称取喹喔啉-2-羧酸和3-甲基喹喔啉-2-羧酸各10mg,用甲醇配成浓度为1mg/mL的标准贮备液,4℃避光保存,有效期6个月试剂配制注意事项偏磷酸甲醇溶液:注意加热过程、浓度配比甲酸甲醇溶液:现用现配磷酸缓冲液:注意调节pH值样品前处理方法准确称取组织5g置于具塞离心管中,加5%偏磷酸10%甲醇溶液8mL,旋涡混合2min,在4℃下6000r/min离心15min,取出上清液,然后再向组织样品中加5%偏磷酸10%甲醇溶液8mL重复提取一次,合并2次上清液。于上清液中加乙酸乙酯8mL,旋涡混合1min,4000r/min离心10min,取有机相层,再加乙酸乙酯8mL重复提取,合并2次有机相。有机相中,加磷酸盐缓冲液6mL,旋涡混和1min,放置10min,使下层清晰,收集水相。另用磷酸盐缓冲液6mL提取乙酸乙酯相一次。使水相清晰,合并2次水提取液。MAX柱依次用甲醇3mL、水3mL活化。加样品提取液至MAX柱中,控制流速小于3mL/min,、甲醇3mL淋洗,抽干,2%甲酸甲醇溶液3mL洗脱,洗脱液置45~50℃水浴氮气吹干,加氢氧化钠-甲醇溶液200μL溶解残渣,旋涡混匀,待测。操作步骤液相色谱柱:Hypersil25cm×:320nm柱温:30℃流动相:甲醇-水(40:60,v/v),加入1%甲酸流速::40μL定量方式:外标法样品测定图1QCA标准溶液HPLC色谱图图2A猪肌肉空白色谱图图2B猪肌肉添加2μg/kg的QCA色谱图测定样品色谱图-QCA图3A猪肝脏空白色谱图图3B猪肝脏添加10μg/kg的QCA色谱图图4A鸡肌肉空白色谱图图4B鸡肌肉添加4μg/kg的QCA色谱图