胰岛素对MK801诱导PC12细胞凋亡的影响（可复制论文）.pdf

胰岛素对盏糚赴蛲龅挠跋摘要谆杼於彼崾芴受体谥惺嗌窬低承藕糯ǖ菀约吧窬低车目塑性方面具有重要的作用。研究指出,乙醇是可以同时作用于谆杼於彼崾芴随着人口的增长和手术技术的提高、种类的发展,目前世界上越来越多的婴幼儿因需要进行各种检查、治疗和手术而接受全身麻醉。一直以来全身麻醉是否会影响婴幼儿的智力发育一直是婴儿亲属和医生们十分关心的问题。婴幼儿处于脑的发育时期,中枢神经系统的可塑性很大,容易受内外环境的影响。和被∷崾芴芴的药物,而胎儿受到乙醇的作用可造成海马和其它脑区神经元的凋亡,从而导致胎儿酒精综合症,表现为行为异常、学习能力下降等精神疾患。同样的,常用的受体拮抗剂氯胺酮是否也会有这样的不良作用已为越来越多的麻醉医生所关注。已有研究表明受体拮抗剂芄坏贾绿逋馀嘌钠ぶ神经元大量凋亡。为了减少这种不良效应,就要求寻找额外的神经保护措旌来阻滞或是减少受体拮抗剂的神经毒性作用。赋龃萍に囟缘蛲鲆鸬纳窬M诵行员溲芯模型的有保护作用,仍蛑赋龊煜赴伤囟訬芴遛卓辜了碌姆⒂中的神经毒性作用有保护作用。两者的作用都与泄亍R鹊核匮蜃右部梢酝ü样的途径来实现抑制凋亡的目的。等人已经证明胰岛素能够通过增加磷酸化嚼炊钥构趸鸬脑ぶ噬窬5蛲霰壤脑黾印R虼宋颐怯欣碛上嘈胰岛素也能够减少有麻醉剂引起的神经元凋亡比例的增加。同时也需要强调,胰岛素作为一种主要影响能量代谢的物质,将会比其它影响婴幼儿其它系统发育的物质有着更广大的应用前景。中山大学硕士学位论文专业:麻醉学研究生:张雯君导师:彭书歧主任医师
笛槟康笛榉椒为取得体外实验的结果,人们首先采用了离体培养原代细胞建立神经系统模型的方法,但在利用原代细胞作为实验模型时,细胞的稳定性不易保证。为了建立更为稳定的神经系统模型,人们开始寻找各种可替代神经元的细胞株。大鼠嗜铬细胞瘤细胞细胞谏窬ひ蜃拥拇碳は路只晌S猩窬L匦缘男孪赴只蟮南赴谛翁生化和生理等各方面均表现出了同神经元相似的特性,被广泛的应用到探索各种因素对神经元影响的领域。本实验拟在建立模拟神经元发育模型的基础上,检测不同浓度对未成熟神经元样细胞存活率和凋亡的影响,随后比较不同浓度胰岛素对前者的影响。从细胞活力度、细胞形态、细胞凋亡率等方面对胰岛素对盏糚赴蛲龅挠跋进行探讨,为进一步的分子机制等研究提供依据。细胞的培养及诱导分化未分化的细胞培养于含ヌヅQG搴%马血清的完全培养液中,并置于。⒑%。及饱和湿度的细胞培养箱中培养。将培养皿中未分化的细胞消化并离心后,重悬于含/神经生长因子.—的完全培养液中,.—诱导分化斓奈闯墒焐窬Q鵓赴为研究对象。.笛榉肿第一部分:诱导分化的细胞随机分成以下榻惺笛椋褐患尤氩缓琋完全培养液,不加任何其它处理因素。椋杭尤隡终浓度为为疞的简写牟缓琋完全培养液。椋杭尤隡终浓度为的不含耆嘌骸胰岛素对盏糚细胞凋亡的影响中山大学硕士学位论文
臣蒲Х椒蛐组:加入张ǘ任弘牟缓琋完全培养液。岷螶京位术端怀簕支术虸单染流式细胞水州觳獠住鞠赴±表示,数据采用单因素方差分析法进行统计,各组间两两比较采用狽—獭椋杭尤隻张ǘ任牟缓琋完全培养液。以上橄赴奔右⒃谙赴嘌渑嘌∈焙蠼懈髦副甑募觳狻第二部分:将诱导产生的凋亡模型作为实验对象,随机分为榻惺笛组:加入终浓度为牟缓琋的完全培养液。椋杭尤隡终浓度为耙鹊核刂张ǘ任猯/牟缓琋的完全培养液。椋杭尤隡终浓度为耙鹊核刂张ǘ任/牟缓琋的完耙鹊核髦张ǘ任/牟缓琋的完椋杭尤隝Ⅵ⒕迪露愿髯橄赴行翁Ч鄄臁倪蜓比色法检测各处理组作用后未成熟神经元样细胞的存活率。亡情况。每组在每种实验中至少设隹滓陨希惺笛榫捎次独立培养的细胞进行重复,避免不同细胞培养造成实验结果的差异。本研究采用完全随机化设计,
笛榻峁对未成熟神经元样细胞的影响鹊核囟噪诱导细胞凋亡的影响细胞的诱导细胞在不含耐耆嘌猩ぱ杆伲允て谖—臁S煤痬的完全培养基培养后,细胞的生长速度降低,细胞开始生出突起。旌ハ赴耐起可达其直径的两倍,天后可以形成致密的网络。砗螅琈结果显示,组细胞存活率略有降低但与对照组无差异,组细胞存活率降低..,组细胞存活率也明显降低翁鄄欤篗处理后,光镜下可见,组细胞与对照组无差异,组细胞突起数量减少,长度缩短,,橄赴杉赴逅跣。ㄋ细胞内空泡增多,突起中断,呈典型的凋亡形态学改变..赴蛲黾觳猓篗处理后,峁允荆橄赴攵哉兆槲薏异,组被染成棕黄色的细胞比例增加,,槊飨钥杉钭厣逅的圆形细胞,并随ǘ鹊脑黾佣黾印ト玖魇浇峁允荆孀臡浓度的增加,凋亡细胞的比例不断增加,当浓度达保蛲霰壤纱ァ在临床范围内,随着胰岛素浓度的增加,细胞存活率相对于组逐渐增加,,但与疞组相